水杉離體組織培養(yǎng)及其影響黃酮類物質(zhì)合成因素的研究.pdf

1、水杉(Metasequoia glyptostroboides Hu et)隸屬杉科(Taxodiaceae)水杉屬(Metasequoia)，是世界上珍稀的孑遺植物，為我國一級保護的特有樹種，被譽為植物界的“活化石”，水杉的發(fā)現(xiàn)是20世紀植物學(xué)界最重大的發(fā)現(xiàn)之一。水杉總黃酮的藥理學(xué)研究表明其具有抗心律失常和抗心肌肥厚等作用，在針對心血管疾病開發(fā)藥物方面具有很好的前景，水杉作為一種可再生藥用植物，受到了廣泛的重視。本研究以水杉的帶腋芽莖

2、段和莖尖為外植體，探索了外植體培養(yǎng)的最佳激素配比，系統(tǒng)地研究了外植體形成無菌苗體系的過程及影響因素，同時探究苗木生長過程中影響黃酮類物質(zhì)積累的各種因素。主要研究成果如下：
　　 ⑴無菌體系建立：水杉外植體隨著滅菌時間的延長，感染率逐漸降低，但同時其褐化率也逐漸升高。結(jié)果顯示，先用75％的酒精浸泡30s，然后用0.2％HgCl2對外植體滅菌8min，可以使水杉的污染率和褐變率都保持較低水平，其污染率達到12.3％，褐變率為39.7

3、％，并且與其他處理組合比較差異性顯著。
　　 ⑵防褐變處理：水杉外植體接種后會褐變現(xiàn)象較為嚴重，添加附加物活性炭(AC)能相對降低褐變率。研究表明，添加0.9 g/L的活性炭對于防止外植體褐變效果最好，可以把褐變率降低到25.9％并保持較高的出芽率(21.5％)。
　　 ⑶水杉愈傷組織誘導(dǎo)及再分化：采用正交試驗設(shè)計，在不同的激素種類及濃度的處理中，水杉外植體大都能產(chǎn)生愈傷組織。實驗結(jié)果顯示，采用培養(yǎng)基MS+2,4-D2.

4、0mg/L+NAA3.0mg/L+6-BA1.5mg/L，水杉愈傷組織誘導(dǎo)率為94.5％，初愈時間為20天左右；適宜愈傷組織再分化的最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.2 mg/L+6-BA1.5mg/L，出芽率為30.2％。
　　 ⑷水杉生根培養(yǎng)：綜合生根率、平均根數(shù)、平均根長三指標試驗數(shù)據(jù)分析，有利于水杉植株生根的培養(yǎng)基配方組合為1/2MS+NAA3.0mg/L+IAA0.1mg/L，生根率為18.8％以上，培養(yǎng)30天后平均根數(shù)可達