青天葵黃酮類物質(zhì)的研究.pdf

1、 目的：以干燥青天葵大葉為研究對(duì)象,在前人的研究基礎(chǔ)上,篩選青天葵總黃酮的提取和純化方法,并進(jìn)行含量測(cè)定；同時(shí)研究青天葵總黃酮的體外抗氧化活性,旨在為青天葵黃酮類化合物的進(jìn)一步分離及單體的制備提供物質(zhì)基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)；用HPLC法總黃酮圖譜鑒別大、中、小葉3種青天葵葉子,比較液相色譜圖來(lái)鑒別3種青天葵。通過分離提純實(shí)驗(yàn)的研究,探索制備對(duì)照品方法,并得到了少量黃酮單體對(duì)照品。方法：在前期研究的基礎(chǔ)上,首先探索最佳的提取方法從青天葵中提取總

2、黃酮類物質(zhì)；并對(duì)其黃酮類物質(zhì)粗提物進(jìn)行純化,篩選最佳分離條件；根據(jù)理化鑒別檢測(cè)其純化物中具有黃酮類物質(zhì)的理化特征,推斷出青天葵純化物是黃酮類。其次采用紫外-可見分光光度法對(duì)青天葵總黃酮進(jìn)行含量測(cè)定。進(jìn)而,采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法、鄰苯三酚自氧化法、普魯士蘭法三種方法分別測(cè)定青天葵中總黃酮對(duì)羥自由基、超氧陰離子的清除能力及總還原能力。最后,用HPLC法總黃酮色譜圖鑒別大、中、小葉3種青天葵葉子,比較液相色譜鑒別3種青天葵。通過各種分離

3、提純實(shí)驗(yàn)研究,探索制備對(duì)照品方法,得到了少量液相色譜圖中前峰黃酮對(duì)照品。結(jié)果：青天葵總黃酮的最佳提取工藝是取青天葵碎葉按95%乙醇溶液滲漉法提取,溶劑重復(fù)循環(huán)使用、藥材粒度為碎葉,浸泡時(shí)間24h,滲漉速度15ml·min-1,提取時(shí)間判斷,滲漉至滲漉液無(wú)鹽酸鎂粉反應(yīng)為止,最佳純化藝是將提取物揮干后硅膠拌樣 吸附,采用石油醚,乙酸乙酯熱回流梯度提取。取乙酸乙酯部位浸膏上聚酰胺柱,洗脫劑先用水洗至無(wú)色,再用10%,30%,40%,50%,6

4、0%乙醇溶液,以3 BV/h速度洗脫,收集溶液,回收溶劑,減壓干燥得50%洗脫部分即可。50%部分總黃酮含量測(cè)定為89.29%,青天葵藥材中總黃酮含量為0.023%。并且,抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,青天葵總黃酮具有清除羥自由基和超氧陰離子的能力及一定的總還原能力。HPLC 法總黃酮色譜圖對(duì)照可以鑒別大中小葉3種青天葵葉子,容易區(qū)別,操作簡(jiǎn)便,重復(fù)性良好。制備液相法制備得少量黃酮單體。結(jié)論：通過對(duì)青天葵總黃酮提取和純化工藝條件的篩選,得到了含量