臨床蛋白質組學在糖尿病腎病研究中的應用.pdf

1、【目的】
　　糖尿病腎病發(fā)病機制至今未完全闡明，有助于早期診斷糖尿病腎病的生物學指標仍然缺乏，如何預測糖尿病腎病的進展也是難題。本研究嘗試應用血清蛋白質組學技術，探索糖尿病腎病致病因子，尋找用于早期診斷糖尿病腎病和預測糖尿病腎病病情進展的指標。
　　【方法】
　　入選年齡、性別匹配研究對象分為4組，每組8個人，組A為正常對照組，組B、C、D分別為2型糖尿病尿白蛋白肌酐比（ACR）﹤30mg/g肌酐組、30mg/g肌酐≤

2、ACR﹤300mg/g肌酐組、ACR≥300mg/g肌酐組。收集空腹血清，蛋白定量后每組形成一血清池。去除白蛋白和去鹽后，每組以等量蛋白質上樣。利用雙向電泳進行蛋白質分離后，銀染，掃描成像。實驗重復3次。應用ImageMaster2D Platinum分析軟件（GE公司）分析四組之間差異表達的蛋白質點。挖取表達差異蛋白質點，酶解后進行基質輔助激光解附離子化飛行時間質譜（MALDI-TOF MS）分析，并與SwissProt數(shù)據(jù)庫進行匹配

3、鑒定蛋白質。
　　【結果】
　　四組血清經(jīng)過雙向電泳分離、染色、分析后，匹配蛋白點共有2119個。挖取11個差異表達蛋白質點進行質譜分析，成功鑒定其中4個蛋白質點。甘露糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶2（MASP2）在組C表達明顯增高；前凝血酶原在組D表達明顯增高；血紅蛋白α亞單位、Igα1鏈 C區(qū)段在組D表達明顯增高。
　　【結論】
　　臨床蛋白質組學可作為糖尿病腎病有效的研究手段。甘露糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶