吸煙相關(guān)劑量鎘對糖尿病大鼠腎臟作用的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),探討吸煙相關(guān)劑量鎘(CSR-Cd)加速糖尿病大鼠腎臟病變進(jìn)程的作用機(jī)制。
　　 方法：
　　 實(shí)驗(yàn)動物分為4組,(1)正常組(N)；(2)正常+Cdcl2組(N+Cdcl2)；(3)糖尿病組(DM)；(4)糖尿病+Cdcl2組(DM+Cdcl2)。動物飼養(yǎng)12周后,收集尿液測微量白蛋白,取血清測鎘含量,取左腎做病理切片,右腎提取蛋白樣品。采用雙向凝膠電泳技術(shù)建立實(shí)驗(yàn)組與對照

2、組的蛋白質(zhì)組差異性表達(dá)圖譜,選擇差異表達(dá)量相差2倍以上的蛋白質(zhì)作為備選的目標(biāo)蛋白質(zhì),采用MALDI-TOF質(zhì)譜儀進(jìn)行肽鏈指紋圖譜分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.N+Cdcl2組和DM+Cdcl2組大鼠血清鎘濃度分別為1.23±0.36μg/μl、1.11±0.24μg/μl,將造成血清此鎘濃度的劑量定義為CSR-Cd。
　　 2.N+Cdcl2組與N組大鼠比較,尿微量白蛋白并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；DM+Cdcl2組與DM

3、組大鼠比較,尿微量白蛋白明顯升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3.使用ImageMaster'2D軟件對雙向電泳結(jié)果進(jìn)行分析,N組與N+Cdcl2組無明顯差異點(diǎn),DM+Cdcl2組與DM組相比,組間匹配顯示蛋白表達(dá)量相差2倍以上的斑點(diǎn)有43個。
　　 4.對43個差異蛋白進(jìn)行MALDI-TOF質(zhì)譜分析,鑒別出26個有意義的蛋白。
　　 結(jié)論：
　　 1.CSR-Cd對正常大鼠腎臟無明顯損傷,但能加速DM大鼠腎