9種抗腫瘤中藥注射液對大鼠CYP3A4酶代謝的影響及消癌平注射液與多西紫杉醇藥動學相互作用的研究.pdf

1、本課題采用肝微粒體體外孵育法對華蟾素、康艾、香菇多糖、消癌平、康萊特、艾迪、欖香烯、參附以及鴉膽子油乳9種抗腫瘤中藥注射液對大鼠肝細胞色素P450酶中主要亞型CYP3A4的活性影響進行系統(tǒng)研究，獲取其代謝信息。并根據(jù)相關數(shù)據(jù)初步篩選出對CYP3A4有明顯抑制或誘導的藥物進行體內探究，從而完善藥物的代謝信息，為臨床合理用藥提供理論指導和實驗室依據(jù)，對保證病人的用藥安全，有著重要的臨床意義。本課題開展的主要工作包括以下兩個章節(jié)的四個方面：<

2、br>　　第一章9種抗腫瘤中藥注射液對大鼠CYP3A4酶代謝的影響
　　目的：
　　采用睪酮作為探針藥物，運用肝微粒體孵育法于體外研究9種抗腫瘤中藥對大鼠細胞色素P450的亞酶CYP3A4活性的影響。
　　方法：
　　色譜條件為：色譜柱：德國MN Nucleodur C18色譜柱(5μm,4.6 mm×250 mm)；流動相：乙腈-水(v:v=45:55)；檢測波長：245 nm；流速：1 ml/min；柱溫：3

3、0℃。采用大鼠肝微粒體體外孵育法，CYP3A4的探針藥物為睪酮，建立測定9種抗腫瘤中藥注射液孵育體系中代謝產物6-OHTS生成量的HPLC法，并通過比較空白對照組與9種抗腫瘤中藥注射液之間探針藥物代謝率的差異，評價其對CYP3A4酶活性的影響。
　　結果：
　　體外溫孵系統(tǒng)最佳條件為：大鼠肝微粒體濃度0.4 mg/mL，睪酮溶液50μmol/L，最佳孵育時間30min。藥動學考察：在肝微粒體孵育體系中6-OHTS的線性方程為

4、Y＝0.0608X＋0.0102(r＝0.9987)，線性范圍為0.075~15μmol/L，線性關系良好，LOD為0.002μmol/L；其日內精密度及日間精密度的RSD均小于7％，RME均小于2%；回收率的RSD均小于6%；所測各項條件下穩(wěn)定性的RSD均小于7%。對CYP3A4酶活性的影響，抗腫瘤中藥的各劑量組均與空白對照組進行比較，低劑量組：對CYP3A4酶的活性有抑制作用的藥物有康艾、注射用香菇多糖、消癌平，有誘導作用的藥物是華

5、蟾素、參附、康萊特、鴉膽子油乳，而欖香烯、艾迪無明顯誘導或抑制作用；中劑量組：對CYP3A4酶的活性有誘導作用的藥物有華蟾素、艾迪和康萊特，有抑制作用的藥物包括康艾、注射用香菇多糖、消癌平、鴉膽子油乳，而參附和欖香烯則無誘導或抑制作用；高劑量組：對CYP3A4酶的活性有抑制作用的藥物有康艾、注射用香菇多糖、消癌平、艾迪、康萊特、鴉膽子油乳，華蟾素則有誘導作用，而參附和欖香烯則無誘導或抑制作用。鴉膽子油乳注射液對CYP3A4酶的半數(shù)抑制濃

6、度IC50為0.78%，消癌平的半數(shù)抑制濃度IC50為0.69%。
　　結論：
　　在臨床，當抗腫瘤中藥注射液與經CYP3A4藥物聯(lián)合使用進行放療或化療時，需警惕抗腫瘤中藥注射液（康萊特、艾迪、鴉膽子油乳、華蟾素、注射用香菇多糖、康艾、消癌平）與該類藥物之間潛在的藥物相互作用。
　　第二章消癌平注射液與多西紫杉醇藥動學相互作用的研究
　　目的：
　　建立大鼠體內測定多西紫杉醇濃度的HPLC法，并考察消癌平對

7、多西紫杉醇在大鼠體內藥動學的影響，為臨床合理用藥提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　色譜條件為：色譜柱：德國MN C18色譜柱(4.6×250 mm,5μm)，Phenomenex ODS預柱(4 mm×3 mm)；流動相：乙腈-水(v:v=50:50)；檢測波長：233 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：25℃；進樣量：20μL。將SD大鼠隨機分為4組，依據(jù)組別的不同以及大鼠的體重注射相應的藥物，除A組僅注射多西紫杉醇及

8、少量生理鹽水外，B、C、D組大鼠還需在A組注射的藥物基礎上再分別注射低、中、高劑量的消癌平，注射后依據(jù)設定好的時間點取血，并采用HPLC法測定多西紫杉醇的血藥濃度。藥動學參數(shù)的擬合采用DAS2.1.1軟件進行，運用SPSS17.0軟件對參數(shù)進行分析。
　　結果：
　　在HPLC方法學研究中，多西紫杉醇的線性范圍為0.7813~75μg/ml，線性方程為Y=8.1013X-3.2652（r>0.999），LOD為0.5208μ

9、g/ml，其日內精密度及日間精密度的RSD均小于8%，RME均小于4%；多西紫杉醇回收率的RSD均小于7%；所測各項條件下穩(wěn)定性的RSD均小于8%。在藥動學方面，大鼠4個組別的血藥濃度均測定后采用DAS2.1.1軟件進行擬合，其中主要藥動學參數(shù)包括：A組 AUC0→t（60.22±3.65μg/ml·h）、AUC0→∞（69.93±5.39μg/ml·h）、Vd（0.18±0.04L/kg）、CL（0.19±0.01ml/kg·h-1）

10、、t1/2(β)（3.08±1.21h）；B組AUC0→t（62.29±3.65μg/ml·h）、AUC0→∞（72.44±7.23μg/ml·h）、Vd（0.18±0.03L/kg）、CL（0.22±0.02ml/kg·h-1）、t1/2(β)（3.95±1.39h）；C組AUC0→t（70.58±11.62μg/ml·h）、AUC0→∞（89.45±19.43μg/ml·h）、Vd（0.16±0.05L/kg）、CL（0.16±0.

11、04ml/kg·h-1）、t1/2(β)（4.53±1.77h）；D組AUC0→t（97.67±20.40μg/ml·h）、AUC0→∞（109.32±41.46μg/ml·h）、Vd（0.14±0.04L/kg）、CL（0.15±0.07ml/kg·h-1）、t1/2(β)（5.72±2.26h）；與A組相比，B、C、D三組的AUC均明顯延長，多西紫杉醇的生物利用度增加，且 C、D組具有統(tǒng)計學意義；三組的t1/2(β)都有明顯延長，多

12、西紫杉醇在大鼠體內消除減緩，但僅D組具有統(tǒng)計學意義；除B組外，剩余兩組的CL均減小，多西紫杉醇在大鼠體內消除減少，但僅D組具有統(tǒng)計學意義，余下參數(shù)無統(tǒng)計學意義。
　　結論：
　　所采用的HPLC法快速、簡便、靈活，可用于多西紫杉醇的藥動學研究；消癌平與多西紫杉醇聯(lián)合使用后，多西紫杉醇的多個藥動學參數(shù)有明顯改變，兩藥之間存在藥物相互作用，消癌平對多西紫杉醇有明顯抑制作用。研究結果不僅驗證了對本課題第一章的結論，消癌平注射液與經