脫管散對內(nèi)固定物感染金黃色葡萄球菌生物膜動物模型干預(yù)的實驗研究.pdf

1、目的：
　　1、內(nèi)固定物感染金黃色葡萄球菌體外模型用脫管散干預(yù)，實驗室環(huán)境下觀察脫管散對金黃色葡萄球菌生物膜體外模型感染的抑制作用。
　　2、用脫管散干預(yù)成熟細菌生物膜動物模型，持續(xù)用藥在電子掃描顯微鏡（SEM）下觀察對不同時期金黃色葡萄球菌生物膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的抑制作用。
　　方法：
　　1、金黃色葡萄球菌株分離單菌落接種于L-Broth培養(yǎng)液中，并將其接種于24孔微量培養(yǎng)板中，用內(nèi)固定物為細菌生物膜生長的載體，SE

2、M觀察細菌生長情況及變化。取培養(yǎng)板細菌生物膜樣本用平板稀釋法進行菌落計數(shù)
　　2、把脫管散制做成濃度為0.1g/ml的混懸液。
　　3、把60只健康青紫藍兔隨機分為3組，每組20只，第一組為對照組，第二組為實驗組，第三組為空白組。各組均于第4天和第7天處死10只大白兔，取出內(nèi)固定物，及切去組織標(biāo)本。
　　4、分組將取出的內(nèi)固定物，依次按照PBS沖洗,戊二醛溶液固定，不同梯度乙醇脫水，醋酸異戊酯置換，樣本 CO2氣體中臨

3、界干燥，離子濺射表面固鍍膜，最終制作成SEM檢測樣本，觀察金黃色葡萄球菌生物膜形態(tài)結(jié)構(gòu)變化。
　　5、將分組取出的內(nèi)固定物周圍組織，做成石蠟切片，然后石蠟切片HE染色，制片完成，顯微鏡下觀測炎癥細胞（中性粒細胞、吞噬細胞、巨噬細胞）、成纖維細胞在兩個時間段的變化。
　　結(jié)果：
　　1、金葡菌培養(yǎng)過程中明顯可見培養(yǎng)板中LB肉湯渾濁，7d后內(nèi)固定物表面形成成熟金黃色葡萄球菌生物膜。細菌菌落計數(shù)統(tǒng)計結(jié)果顯示：隨著培養(yǎng)時間的不

4、斷增加， LB肉湯中金黃色葡萄球菌的濃度呈上升趨勢，脫管散給藥組 LB肉湯中金黃色葡萄球菌的濃度呈下降趨勢。
　　2、青紫藍兔隨著實驗分組處死取材制作樣本送檢，對照組的內(nèi)固定物表面金黃色葡萄球菌生物膜逐漸增加，實驗組脫管散干預(yù)，其對內(nèi)固定物表面金黃色葡萄球菌生物膜的抑制作用逐漸增強,空白組結(jié)果顯示無細菌和生物膜生成，有成纖維細胞生成，結(jié)果表明脫管散干預(yù)實驗組對金黃色葡萄球菌生物膜有較強的抑制作用。
　　3、通過不同分組的組織

5、病理學(xué)檢查，對照組炎性細胞逐漸增加，成纖維細胞生成較少；脫管散干預(yù)實驗組的組織病理學(xué)檢查炎性細胞逐漸減少，成纖維細胞逐漸增加；空白組炎性細胞生成較少，成纖維細胞逐漸增加；脫管散干預(yù)實驗組對金黃色葡萄球菌生物膜感染創(chuàng)面有促進愈合的作用。
　　結(jié)論：
　　1、脫管散對內(nèi)固定物感染金黃色葡萄球菌生物膜體外模型感染有抑制作用。
　　2、脫管散對內(nèi)固定物感染金黃色葡萄球菌生物膜形態(tài)結(jié)構(gòu)有抑制作用。
　　3、脫管散對內(nèi)固定物

6、感染金黃色葡萄球菌生物膜的創(chuàng)面有促進愈合的作用。
　　3、通過不同分組的組織病理學(xué)檢查，對照組炎性細胞逐漸增加，成纖維細胞生成較少；脫管散干預(yù)實驗組的組織病理學(xué)檢查炎性細胞逐漸減少，成纖維細胞逐漸增加；空白組炎性細胞生成較少，成纖維細胞逐漸增加；脫管散干預(yù)實驗組對金黃色葡萄球菌生物膜感染創(chuàng)面有促進愈合的作用。
　　結(jié)論：
　　1、脫管散對內(nèi)固定物感染金黃色葡萄球菌生物膜體外模型感染有抑制作用。
　　2、脫管散對內(nèi)