硫酸新霉素控制草魚細(xì)菌性腸炎用藥方案及對異育銀鯽免疫毒性的研究.pdf

1、由于水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)發(fā)展時(shí)間短，漁藥的使用缺乏科學(xué)合理的指導(dǎo)導(dǎo)致藥物殘留、細(xì)菌耐藥、魚體機(jī)體損傷等問題不斷出現(xiàn)。為了合理指導(dǎo)抗生素在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的使用，本研究采用硫酸新霉素為研究對象，對由嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）引起的草魚Ctenopharyngodon idellus）細(xì)菌性腸炎病制定用藥方案；以異育銀鯽（Carassius auratus）為實(shí)驗(yàn)對象，研究硫酸新霉素對機(jī)體免疫力的影響及對皰疹病毒2型的影響。

2、
　　1.硫酸新霉素對草魚細(xì)菌性腸炎病的用藥方案研究
　　水溫（25±2）℃時(shí)，給體質(zhì)量150～200 g的草魚分別口灌4種劑量（10、20、30、40 mg/kg體質(zhì)量）的硫酸新霉素，采用柱前衍生化高效液相色譜法測定血液、腸道和肌肉內(nèi)的實(shí)時(shí)藥物濃度，結(jié)合硫酸新霉素對嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila)的體外藥效學(xué)和草魚單次口灌不同劑量的硫酸新霉素的體內(nèi)藥代動力學(xué)以及硫酸新霉素在腸道內(nèi)的代謝規(guī)律進(jìn)行研究。

3、結(jié)果顯示：硫酸新霉素對嗜水氣單胞菌的最小抑菌濃度（MIC）為6μg/mL，4MIC藥物濃度下抗菌后效應(yīng)（PAE）為1 h；按不同劑量口灌草魚后，草魚腸道內(nèi)0～24 h用藥曲線面積（AUC24）/MIC分別為52.467、72.963、109.907、136.489；腸道內(nèi)藥物的最大濃度（Cmax）/MIC分別為10.93、15.24、23.20、28.98；口灌劑量為40 mg/kg體質(zhì)量硫酸新霉素時(shí)，血藥濃度達(dá)峰時(shí)間（Tmax）為2

4、h，達(dá)峰質(zhì)量濃度（Cmax）為3.833μg/mL。綜合腸道AUC24/MIC和腸道Cmax/MIC兩個(gè)指標(biāo)，確定硫酸新霉素對由腸型嗜水氣單胞菌引起的草魚腸炎病的給藥方案為：每日給藥1次，每次40 mg/kg，連續(xù)給藥3～5 d，休藥期為8 d。
　　2.硫酸新霉素對異育銀鯽免疫毒性研究
　　硫酸新霉素對異育銀鯽的急性毒性試驗(yàn)，通過 Bliss法計(jì)算得到96hLD50為1029.307 mg/kg，安全濃度為102.9 mg

5、/kg。在此基礎(chǔ)上，設(shè)置10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg給藥組，1個(gè)空白對照組；在給藥后24 h、48 h、72 h、96 h對血液中非特異免疫指標(biāo)和肝臟中抗氧化酶進(jìn)行測定；通過濃度為1000μmol/L、500μmol/L、100μmol/L、0μmol/L的硫酸新霉素細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)異育銀鯽鰭條細(xì)胞，檢測各組不同時(shí)間段細(xì)胞的存活率。綜合硫酸新霉素對血液中非特異免疫指標(biāo)、肝臟中抗氧化酶的影響和細(xì)胞毒性研究，判斷硫酸新

6、霉素對異育銀鯽的免疫力的影響。結(jié)果顯示：硫酸新霉素極顯著提高各給藥組血液中白細(xì)胞數(shù)量和補(bǔ)體C3的含量（P＜0.01）；血清抗菌活性和溶菌酶含量均有所降低，但無顯著性差異（P＞0.05）；超氧化物歧化酶活性表現(xiàn)出先上升后下降再上升的趨勢，其中40 mg/kg給藥組超氧化物歧化酶活性在96 h后顯著升高（P＜0.05）；過氧化氫酶活性變化趨勢與過氧化物歧化酶相似，其中10 mg/kg、40 mg/kg給藥組過氧化氫酶活性在96 h后顯著升高

7、（P＜0.05）；丙二醛含量表現(xiàn)為先下降后上升再下降的趨勢，96 h后各給藥組丙二醛的含量顯著下降（P＜0.05）；蛋白羰基含量的變化趨勢和丙二醛相似，其中10 mg/kg、20 mg/kg給藥組蛋白羰基的含量在96 h后顯著下降（P＜0.05）。給藥組鰭條細(xì)胞的存活率與對照組對比12 h后有所上升，但無顯著差異（P＞0.05）。綜合以上結(jié)果表明，適量的硫酸新霉素對異育銀鯽鰭條細(xì)胞無影響，并且可以提高機(jī)體非特異性免疫力，增強(qiáng)肝臟中抗氧化

8、酶的活力。
　　3.硫酸新霉素對皰疹病毒2型引起異育銀鯽死亡率的影響研究
　　水溫24℃時(shí)，設(shè)置40、20、0 mg/kg給藥組和1個(gè)空白對照組，給藥24 h后腹腔注射皰疹病毒2型粗提液0.1 mL，觀察記錄2周內(nèi)異育銀鯽的死亡量并測定40、0 mg/kg給藥組血液中病毒的滴度，發(fā)現(xiàn)注射病毒粗提液后第3天，20 mg/kg用藥組和未用藥組開始發(fā)病死亡,第4天，40 mg/kg用藥組開始發(fā)病死亡，第7～9天，各組死亡達(dá)到高峰,