溶菌酶在異育銀鯽和草魚飼料中的應(yīng)用研究.pdf

1、隨著水產(chǎn)集約化養(yǎng)殖的發(fā)展,抗生素殘留、耐藥性等問題已經(jīng)制約了水產(chǎn)養(yǎng)殖的發(fā)展,開發(fā)新型安全的飼料添加劑是解決這些問題的一個重要途徑。溶菌酶就是新型安全飼料添加劑的一種。
　　本文旨在研究溶菌酶在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用可能性,并初步確定在異育銀鯽和草魚飼料中的用量范圍。本文共三個試驗部分,第一章為溶菌酶在異育銀鯽飼料中的應(yīng)用,旨在研究溶菌酶在異育銀鯽飼料中應(yīng)用的可能性,第二章和第三章是在第一章的基礎(chǔ)上,將溶菌酶制品優(yōu)化,驗證溶菌酶作為飼料添

2、加劑的穩(wěn)定性;并研究具備飼料添加劑穩(wěn)定性的溶菌酶優(yōu)化制品在草魚飼料中的應(yīng)用效果,初步確定溶菌酶在草魚飼料中的適宜用量。
　　溶菌酶在異育銀鯽飼料中的應(yīng)用研究試驗采用單因子試驗設(shè)計,選用當(dāng)年異育銀鯽,在試驗池中用基礎(chǔ)飼料養(yǎng)殖40d,使其適應(yīng)試驗條件,并消除試驗魚因營養(yǎng)和環(huán)境造成的差異。試驗分為11組,每組4個重復(fù),每個重復(fù)30尾(初重28.11±2.14g),放入2m×0.75m×1.0m的網(wǎng)箱內(nèi)養(yǎng)殖,養(yǎng)殖周期60d,研究飼料中添加

3、溶菌酶和其包被品(采用膠體法制備的溶菌酶顆粒)對異育銀鯽生長性能、內(nèi)源酶指標(biāo)和免疫機能即抗感染能力的影響。溶菌酶組設(shè)置6個梯度:0mg/kg(對照組),10mg/kg(L1),20 mg/kg(L2),30 mg/kg(L3),40 mg/kg(L4)和50 mg/kg(L5)。溶菌酶包被品組根據(jù)初始酶活的理論值將添加量分別設(shè)置為:2g/kg(EL1),4 g/kg(EL2),6 g/kg(EL3),8 g/kg(EL4)和10 g/k

4、g(EL5)。結(jié)果表明:飼料中添加溶菌酶或其包被品對異育銀鯽的生長性能有顯著影響。包被組相對增重率除 EL1組和EL3組比對照組有顯著提高(P<0.05),其他組無顯著差異;溶菌酶L5組相對增重率比對照組有顯著的降低,其他組和對照組無顯著差異(P>0.05)。包被組飼料系數(shù)EL1、EL2組和EL3組比對照組有顯著降低,EL5組比對照組有顯著的升高(P<0.05),呈現(xiàn)出隨包被品濃度的增加先降低再升高的趨勢;溶菌酶除 L5組比對照組有顯著

5、的提高(P<0.05),其他組和對照組無顯著差異(P>0.05)。在相同的酶活力條件下,包被組試驗魚的生長性能普遍優(yōu)于溶菌酶組。攻毒結(jié)果說明,飼料中添加溶菌酶和其包被品可增強異育銀鯽對嗜水氣單胞菌的抗感染能力,提高異育銀鯽的非特異性免疫功能。對內(nèi)源酶的影響溶菌酶組和溶菌酶包被品組的趨勢基本一致。綜合生長和免疫性能兩方面,包被品組表現(xiàn)出更多的優(yōu)勢,在本試驗條件下,溶菌酶包被品在異育銀鯽飼料中的適宜添加量為2-6g/kg。
　　鑒于第

6、一章試驗中包被品對異育銀鯽生長性能和免疫性能的影響均優(yōu)于未經(jīng)處理的溶菌酶,而由于凝膠法制備的包被品的顆粒較大,且酶活力的穩(wěn)定性較差,故對溶菌酶包被工藝進(jìn)行優(yōu)化,采用薄膜法進(jìn)行包被制作成近似粉狀的溶菌酶制品,并對其性質(zhì)和應(yīng)用作出如下研究。
　　采用薄膜法制備的溶菌酶制品的穩(wěn)定性研究,共設(shè)計了四個方面的試驗:溶菌酶性質(zhì)試驗,飼料加工環(huán)境模擬試驗,體外消化試驗和儲存試驗。溶菌酶性質(zhì)試驗通過設(shè)置不同溫度條件和pH條件測定溶菌酶制劑的酶活變

7、化。試驗結(jié)果表明,該溶菌酶制劑的最適溫度為80℃左右,而pH值在3.0-8.0之間對溶菌酶的酶活影響不顯著(P>0.05)。通過擠壓和高溫處理模擬飼料加工環(huán)境,研究其對溶菌酶酶活的影響。試驗結(jié)果表明,擠壓和高溫處理對溶菌酶飼料的酶活力影響不顯著(P>0.05)。體外消化試驗研究溶菌酶草魚、鯉魚和鯽魚消化道粗酶液作用下的酶活變化情況。結(jié)果表明,魚類消化道所分泌的消化酶對溶菌酶制品活力的影響因消化道位置不同而不同,總體看來在中腸處溶菌酶活力

8、損失最大。消化酶對溶菌酶制品活力的影響也與魚的種類有關(guān),相比較而言,草魚消化道對該溶菌酶制品的分解能力較強。溶菌酶飼料的儲存試驗表明,隨著保存時間的延長,飼料中的溶菌酶活力逐漸降低。200-400mg/kg組在30d后較為穩(wěn)定;100mg/kg組儲存試驗中呈現(xiàn)折線下降;500mg/kg組呈現(xiàn)持續(xù)下降的趨勢。
　　優(yōu)化后的溶菌酶制品在草魚飼料中的應(yīng)用研究試驗采用單因子試驗設(shè)計,選用當(dāng)年草魚夏花,放于試驗池中用基礎(chǔ)飼料養(yǎng)殖30d,使其

9、適應(yīng)試驗條件,并消除試驗魚因營養(yǎng)和環(huán)境造成的差異。在基礎(chǔ)飼料中分別添加溶菌酶制品0(對照)、100、200、300、400和500mg/kg,每組設(shè)置5個重復(fù),飼喂草魚(6.93±0.27g)60d。通過生長性能和抗感染能力兩個方面研究溶菌酶的效果,并確定適宜用量。試驗結(jié)果表明,試驗45天時,試驗組的草魚特定生長率顯著低于對照組,60天時,100-300mg/kg組的草魚特定生長率與對照組差異不顯著,400mg/kg組和500mg/kg

10、組顯著低于對照組(P<0.05)。飼料中溶菌酶含量對草魚的飼料系數(shù)的影響呈現(xiàn)先降低再升高的趨勢,200mg/kg組飼料系數(shù)最低。通過腹腔注射的方法對草魚進(jìn)行嗜水氣單胞菌攻毒,結(jié)果表明,200-500mg/kg組的草魚死亡率顯著低于對照組和100mg/kg組(P<0.05)。飼用溶菌酶對草魚內(nèi)源免疫酶活性和內(nèi)源消化酶活性有一定的刺激作用。抑菌試驗表明,該溶菌酶制品對常見革蘭氏陰性菌嗜水氣單孢菌、哈維氏弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌有明顯的抑菌