Rho GTPase-cofilin信號(hào)通路在急性離心運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)骨骼肌解聚及針刺干預(yù)中的作用.pdf

1、目的：了解Rho GTPase/cofilin信號(hào)通路在離心運(yùn)動(dòng)引起的骨骼肌解聚及針刺干預(yù)的作用，為探討運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的骨骼肌超微結(jié)構(gòu)改變發(fā)生的機(jī)制及針刺恢復(fù)骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的機(jī)制提供重要的理論依據(jù)。
　　方法：將8周齡SD大鼠分為安靜對(duì)照、運(yùn)動(dòng)、針刺、運(yùn)動(dòng)+針刺組。運(yùn)動(dòng)組大鼠進(jìn)行坡度-16°，16米/分的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)90分鐘；針刺干預(yù)方案斜刺大鼠下肢比目魚肌，留針2分鐘。干預(yù)后即刻、12、24、48、72、120小時(shí)取材，免疫組化和免疫熒光

2、等方法觀察骨骼肌F-actin解聚情況和cofilin2及F-actin的分布、定位及其熒光表達(dá)；免疫印跡法測(cè)試各組大鼠Rho、Rac1、Cdc42、LIM及LIM磷酸化、cofilin2及cofilin磷酸化等7個(gè)指標(biāo)的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：（1）急性離心運(yùn)動(dòng)可導(dǎo)致大鼠骨骼肌Rho GTPase家族中Rho蛋白表達(dá)降低（P<0.01），通過LIM磷酸化的降低（P<0.01），導(dǎo)致cofilin2磷酸化程度降低（P<0.01）。此

3、時(shí)，Rho GTPase家族中Cdc42、Rac1蛋白表達(dá)的增加（P<0.01）不能拮抗這種降低趨勢(shì)，導(dǎo)致骨骼肌肌動(dòng)蛋白在運(yùn)動(dòng)后24小時(shí)明顯解聚，在72小時(shí)解聚現(xiàn)象最活躍。（2）安靜狀態(tài)大鼠針刺后12到24小時(shí)，可以通過Rho GTPase家族中Rho和Rac1蛋白表達(dá)升高（P<0.01），提高LIM磷酸化（P<0.01）從而促進(jìn)cofilin2磷酸化的升高（P<0.01），維持骨骼肌肌動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，在24小時(shí)恢復(fù)效果較明顯；針刺導(dǎo)致

4、的 Cdc42蛋白表達(dá)的降低并不足以抑制cofilin2磷酸化的升高趨勢(shì)。（3）針刺可以通過Rho、Rac1蛋白表達(dá)的升高（P<0.01），影響離心運(yùn)動(dòng)后大鼠骨骼肌LIM磷酸化的升高（P<0.01）從而提高cofilin2磷酸化（P<0.01），維持肌動(dòng)蛋白多聚體結(jié)構(gòu)；抑制了運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致 cofilin2磷酸化水平降低的趨勢(shì)，針刺后12小時(shí)就發(fā)揮了維持骨骼肌肌動(dòng)蛋白穩(wěn)定的作用。
　　結(jié)論：（1）急性離心運(yùn)動(dòng)主要通過下調(diào)Rho蛋白，抑制