Omi在離心運動誘導骨骼肌細胞凋亡及針刺干預中的作用.pdf

1、目的：
　　觀察離心運動對骨骼肌細胞凋亡和線粒體的影響，分析絲氨酸蛋白酶（Omi）在離心運動后骨骼肌細胞凋亡中的作用機制，探究針刺干預對骨骼肌細胞凋亡的作用。
　　方法：
　　研究一和研究二將大鼠分為安靜對照、離心運動、單純針刺和運動針刺四大組，研究三將大鼠分為安靜對照、離心運動、單純阻斷、DMSO和運動阻斷五大組。使用熒光酶聯(lián)免疫吸附法檢測半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶（Caspase-3，-8，-9，-12）的活性；

2、透射電鏡觀察線粒體超微結構；熒光染色檢測線粒體膜通透性轉換孔（MPTP）的開放情況；Western Blot和Realtime-PCR法分別檢測Omi、凋亡抑制蛋白（XIAP）的蛋白表達和基因水平；Co-IP法檢測XIAP和Omi的相互結合作用。
　　結果：
　?。?）離心運動后Caspase-3，-8，-9，-12活性均一過性升高，而針刺能顯著降低運動后Caspase-3，-8，-9，-12活性。離心運動后線粒體分布和形態(tài)

3、出現(xiàn)典型的病理學改變，而針刺能促進其恢復。離心運動能使MPTP開放增加，而針刺能減小運動后MPTP開放程度。
　　（2）離心運動后Omi、XIAP的蛋白表達和mRNA水平均呈一過性升高，針刺能明顯下調運動后Omi的表達，上調運動后XIAP的表達。離心運動和針刺干預均能促進XIAP和Omi相互結合。
　　（3）Omi的特異性抑制劑 Ucf-101能明顯降低運動后Caspase-3，-9活性，對運動后Caspase-8，-12活

4、性沒有影響。Ucf-101能下調運動后Omi的蛋白表達，上調運動后XIAP的蛋白表達。
　　結論：
　　（1）離心運動可以引起骨骼肌細胞凋亡，這種凋亡可能有Caspase-8、Caspase-9和Caspase-12依賴的凋亡途徑同時參與。而針刺干預能通過抑制這三條途徑來減少細胞凋亡的發(fā)生。離心運動可以導致骨骼肌線粒體結構損傷，MPTP高通透性開放，而針刺能促進其恢復。
　?。?）離心運動可能通過上調Omi的表達，促進