離心運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)骨骼肌細(xì)胞微管損傷的機(jī)制及針刺干預(yù)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:觀察離心運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌微管蛋白以及相關(guān)蛋白的影響,分析其對(duì)微管的調(diào)控作用;探討離心運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌微管損傷的分子機(jī)制;觀察針刺干預(yù)對(duì)離心運(yùn)動(dòng)后骨骼肌微管的影響,闡明其作用的機(jī)理。
  方法:以雄性SD大鼠為研究對(duì)象。實(shí)驗(yàn)一分為單純對(duì)照組和離心運(yùn)動(dòng)組(下坡跑,坡度-16°,速度16m/min,時(shí)間90min);實(shí)驗(yàn)二分為單純對(duì)照組、安慰劑組(腹腔注射30%DMSO的生理鹽水)、單純阻斷組(腹腔注射SB203580,15mg/

2、kg體重)、單純運(yùn)動(dòng)組和阻斷運(yùn)動(dòng)組;實(shí)驗(yàn)三分為單純對(duì)照組、單純針刺組(小腿三頭肌縱向從遠(yuǎn)端斜刺,進(jìn)針角度約30°,進(jìn)針止于小腿三頭肌肌腹處,留針2分鐘)、單純運(yùn)動(dòng)組和針刺運(yùn)動(dòng)組。各組又按時(shí)相點(diǎn)分為0h、12h、24h、48h和72h小組,大鼠在對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)取比目魚(yú)肌進(jìn)行檢測(cè)。采用免疫印跡法檢測(cè)α-tubulin和MAP4蛋白表達(dá)、Op18和p38蛋白表達(dá)及磷酸化表達(dá)情況,免疫共沉淀法檢測(cè)MAP4和p38/MAPK之間的相互作用,免疫熒光組

3、織化學(xué)(激光共聚焦法)觀察和定量α-tubulin的分布和表達(dá)。
  結(jié)果:(1)離心運(yùn)動(dòng)后大鼠骨骼肌比目魚(yú)肌中的微管蛋白出現(xiàn)一過(guò)性的表達(dá)降低;MAP4蛋白出現(xiàn)一過(guò)性的升高,Op18蛋白表達(dá)及磷酸化均出現(xiàn)一過(guò)性的降低,但磷酸化表現(xiàn)更為明顯。免疫熒光結(jié)果和蛋白表達(dá)結(jié)果一致。(2)使用p38特異性抑制劑SB203580結(jié)合離心運(yùn)動(dòng)后MAP4蛋白表達(dá)減少,Op18蛋白表達(dá)特別是其磷酸化表達(dá)增加,骨骼肌微管蛋白的解聚出現(xiàn)緩解;免疫共沉淀顯

4、示MAP4和p38/MAPK激酶之間有相互作用。(3)運(yùn)動(dòng)后針刺使骨骼肌微管蛋白α-tubulin表達(dá)上調(diào),下調(diào)MAP4的蛋白表達(dá)及上調(diào)Op18磷酸化的表達(dá),同時(shí)下調(diào)了p38蛋白及磷酸化表達(dá)。
  結(jié)論:(1)離心運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)骨骼肌細(xì)胞微管損傷,其相關(guān)蛋白MAP4和Op18參與了這一過(guò)程的調(diào)控。(2)離心運(yùn)動(dòng)激活p38激酶,導(dǎo)致MAP4蛋白增加、Op18蛋白減少,二者協(xié)同調(diào)控引起微管結(jié)構(gòu)的改變。(3)運(yùn)動(dòng)后針刺可以緩解骨骼肌微管的損傷

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