腎敷靈外敷配合雷公藤多甙治療難治性腎病大鼠腎損害機(jī)理的研究.pdf

1、目的:
　　 本實驗觀察腎敷靈外敷配合雷公藤多甙對難治性腎病大鼠的療效;探討其對炎癥因子NF-κB及TGF-β、nephrin蛋白及脂代謝的影響,為臨床進(jìn)一步的推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 按照隨機(jī)化的原則分為4組,為正常組、模型組、對照組(雷公藤多甙灌胃)、治療組(腎敷靈外敷加雷公藤多甙灌胃)。模型組、對照組,治療組大鼠尾靜脈一次性注射阿霉素6.0mg/kg(阿霉素按2mg/ml溶于生理鹽水中,即

2、3.0ml/kg)。正常組大鼠注射等量生理鹽水。實驗第7天開始灌胃,正常組、模型組每天灌胃生理鹽水,劑量1ml/100克;對照組每天灌胃雷公藤多甙混懸液(濃度為2mg/ml),劑量1ml/100克;治療組在對照組治療基礎(chǔ)上外敷腎敷靈于大鼠神闕、腎腧、脾腧穴位。實驗前和實驗開始后2周、4周收集大鼠24小時尿液檢測24尿蛋白定量;實驗結(jié)束后收集血清檢測白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、總膽固醇(CHOL)和甘油三脂(TG)

3、;Western Blot方法檢測腎組織中跨膜糖蛋白(nephrin)、核因子-κB(NF-κB)、轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)的水平;PCR方法檢測腎組織中nephrin;免疫組化方法檢測腎組織中載脂蛋白A-I(apoA-I)及核心蛋白聚糖(decorin)的水平。
　　 結(jié)果:
　　 1.實驗第14天、第28天,模型組、對照組及治療組大鼠體重明顯低于正常組(P＜0.01);模型組大鼠體重均明顯低于對照組和治療組(P

4、＜0.01),治療組與對照組比較,體重?zé)o明顯差異(P＞0.05)。
　　 2.實驗第14天、28天,模型組、對照組及治療組大鼠24h尿蛋白顯著高于正常組;與模型組相比,對照組及治療組24h尿蛋白量均顯著受到抑制(P均＜0.01);治療組24h尿蛋白量28天低于對照組(P＜0.01);
　　 實驗第28天,與正常組相比,模型組、對照組、治療組血清白蛋白水平明顯降低P均＜0.01):與模型組相比,對照組及治療組明顯升高(P均

5、＜0.01);治療組則明顯高于對照組(P均＜0.01);
　　 實驗第28天,與正常組相比,模型組、對照組、治療組血清膽固醇、甘油三酯水平明顯升高(P均＜0.01);與模型組相比,對照組及治療組明顯降低(P均＜0.01):治療組則明顯低于對照組(P均＜0.01);
　　 血清尿素氮和肌配各組間無統(tǒng)計學(xué)差異;
　　 光鏡下發(fā)現(xiàn)正常組大鼠腎小球系膜區(qū)無增生、沉積物,基底膜未見病變,毛細(xì)血管開放佳;模型組大鼠可見彌漫性

6、腎小球系膜區(qū)增寬,系膜細(xì)胞、系膜基質(zhì)增生,毛細(xì)血管腔狹窄;對照組和治療組組病變均不同程度減輕。
　　 電鏡下,正常組大鼠腎小球基底膜結(jié)構(gòu)完整,系膜未見增生,足突清晰完整;模型組腎小球足細(xì)胞足突的廣泛融合,系膜基質(zhì)增多,腎小球基底膜增厚,系膜細(xì)胞及基膜內(nèi)未見明顯電子致密物沉積,腎小球毛細(xì)血管開放,內(nèi)皮細(xì)胞輕度腫脹等。對照組和治療組病理改變較模型組明顯減輕,足突的部分融合,系膜基質(zhì)輕度增多,腎小球基底膜增厚減輕。
　　 3.

7、實驗第28天,與正常組相比,模型組、對照組、治療組大鼠腎組織中NF-κB、TGF-β的表達(dá)明顯上調(diào)(P均＜0.01);與模型組相比,對照組及治療組明顯降低(P均＜0.01);其中NF-κB的水平治療組則明顯低于對照組(P均＜0.01);
　　 4.與正常組相比,模型組、對照組、治療組大鼠腎組織中nephrin蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(P均＜0.01);與模型組相比,對照組及治療組明顯升高(P均＜0.01);治療組則明顯高于對照組(P＜0

8、.01);
　　 5.實驗第28天,與正常組相比,模型組、對照組、治療組大鼠腎組織中apoA-Ⅰ表達(dá)明顯降低(P均＜0.01);與模型組相比,對照組及治療組明顯升高(P均＜0.01);治療組與對照組有明顯差異(P均＜0.01);
　　 實驗第28天,與正常組相比,模型組、對照組、治療組大鼠腎組織中decorin表達(dá)明顯升高(P均＜0.01);與模型組相比,對照組及治療組明顯降低(P均＜0.01);治療組與對照組有明顯差異

9、(P均＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1.腎敷靈外敷合并雷公藤多甙在改善難治性腎病大鼠營養(yǎng)狀況,降低蛋白尿和血清膽固醇及甘油三酯,升高血清白蛋白方面有良好作用。并且可以減輕大鼠腎臟病理改變,為腎敷靈治療難治性腎病大鼠,減輕腎臟損害提供了組織病理學(xué)上的依據(jù)。
　　 2.腎敷靈外敷配合雷公藤多甙可通過抑制NF-κB、TGF-β表達(dá),減輕難治性腎病大鼠腎小球的炎癥反應(yīng),從而抑制腎小球的損傷。
　　 3.腎敷