小白菊內(nèi)酯對(duì)人小細(xì)胞肺癌NCI-H446細(xì)胞增殖及凋亡作用研究.pdf

1、目的：
　　研究小白菊內(nèi)酯（parthenolide, PTL）抑制人小細(xì)胞肺癌NCI-H446細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用，并探究其中可能存在的分子作用機(jī)制。
　　方法：
　　實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組與藥物處理組（1.5μg/ml組、2.0μg/ml組、2.5μg/ml組和3.0μg/ml組）。采用MTT比色法檢測(cè)經(jīng)不同濃度組PTL處理48h后NCI-H446細(xì)胞的增殖水平；Hochest33258熒光染料使細(xì)胞核著色，倒置熒

2、光顯微鏡下觀察凋亡細(xì)胞核形態(tài)學(xué)變化；流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡率變化情況； qRT-PCR分別檢測(cè)不同濃度組 PTL處理48h后NCI-H446細(xì)胞中 NF-κB、Caspase-3、8、9基因的表達(dá)水平；以及Wsetern Blot檢測(cè)NF-κB、Caspase-3、8、9蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.MTT檢測(cè)結(jié)果顯示：PTL抑制小細(xì)胞肺癌 NCI-H446細(xì)胞增殖并呈濃度依賴性。
　　2.Hochest332

3、58染色結(jié)果顯示，PTL作用NCI-H446細(xì)胞48h后，細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞核固縮碎裂，形成凋亡小體，細(xì)胞發(fā)生凋亡。
　　3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示， PTL處理 NCI-H446細(xì)胞后，細(xì)胞發(fā)生凋亡，且凋亡水平與藥物濃度梯度呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4.RT-PCR及 Wsetern Blot結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，PTL下調(diào)NCI-H446細(xì)胞中NF-κB基因及蛋白表達(dá)，同時(shí)能夠上調(diào)Caspase-3