Casticin對小細胞肺癌NCI-H446細胞系LCSCs自我更新及β-catenin表達的影響.pdf

1、目的:研究紫花牡荊素(Casticin)對人小細胞肺癌NCI-H446細胞系腫瘤干細胞樣細胞(Lung cancer stem like cells，LCSLCs)的自我更新能力及β-catenin表達的影響，初步探討紫花牡荊素抑制肺癌干細胞特性作用機制。
　　 方法:體外培養(yǎng)人肺癌NCI-H446細胞系，采用干細胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)法富集并得到肺癌球形成細胞，并鑒定作為LCSLCs。腫瘤球形成試驗檢測LCSLCs的自我更新能力

2、。Western blot分析NCI-H446細胞系腫瘤球形成細胞以及非分選細胞的干細胞生物標志物CD133，CD44蛋白表達狀態(tài)。本文建立裸鼠皮下移植瘤模型來檢測人肺癌NCI-H446細胞系細胞和肺癌球形成細胞的裸鼠皮下成瘤的能力;并進行移植瘤組織切片，HE染色，光學顯微鏡下檢測病理組織學形態(tài)。MTT法測定Casticin對LCSLCs增殖活性的影響。腫瘤球形成實驗測定Casticin對LCSLCs自我更新的影響。Western bl

3、ot分析Casticin對LCSLCs的CD133和CD44蛋白表達的影響。Western blot分析對照檢測NCI-H446細胞系細胞與LCSLCs的β-catenin蛋白表達以及Casticin對β-catenin蛋白表達的影響。
　　 結果:1.在干細胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)中，人肺癌NCI-H446細胞系細胞成球生長，形成肺癌球。2.腫瘤球形成試驗結果表明人肺癌NCI-H446細胞系肺癌球形成細胞具有自我更新能力。3.與人

4、肺癌NCI-H446細胞系細胞相比，人肺癌NCI-H446細胞系肺癌球形成細胞干細胞標志物CD133和CD44蛋白表達水平更高。4.裸鼠皮下成瘤實驗證明了源自人肺癌NCI-H446細胞系肺癌球形成細胞具有高致瘤特性。5.Casticin優(yōu)先抑制LCSLCs細胞增殖活性。6.Casticin具有抑制LCSLCs自我更新作用。7.Casticin顯著下調干細胞標志蛋白CD133和CD44的表達，呈劑量依賴性。8.人肺癌NCI-H446細胞系

5、肺癌球形成細胞高表達β-catenin蛋白，Casticin以劑量依賴方式抑制其β-catenin蛋白表達。
　　 結論:
　　 1.干細胞條件培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)得到的人小細胞肺癌NCI-H446細胞系肺癌球形成細胞具有肺癌干細胞特性。
　　 2.多甲氧基黃酮化合物Casticin具有抑制LCSLCs自我更新作用。
　　 3.Casticin抑制LCSLCs自我更新作用與其下調腫瘤干細胞信號分子β-caten