基于胃Cajal間質(zhì)細胞自噬探討柴胡疏肝散促進功能性消化不良大鼠胃動力的作用機制.pdf

1、目的:基于胃Cajal間質(zhì)細胞(interstitial cells of cajal，ICC)自噬探討柴胡疏肝散促進功能性消化不良(functional dyspepsia，F(xiàn)D)大鼠胃動力的作用機制。
　　方法:將60只成年健康SD大鼠按隨機分組法分為正常對照組、模型組、柴胡疏肝散低劑量(0.16 g/ml)組（柴低組）、柴胡疏肝散中劑量(0.32g/ml)組（柴中組）、柴胡疏肝散高劑量(0.64 g/ml)組（柴高組），每組

2、12只。除外正常對照組，余各組均采取改良郭氏夾尾刺激法構(gòu)建FD大鼠模型并予相應(yīng)藥物灌胃，共連續(xù)4w。半固體糊灌胃法測算各組大鼠胃排空率;正常光線下肉眼觀察大鼠胃組織;對大鼠胃組織行蘇木精-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining，HE)并在光學(xué)顯微鏡觀察胃組織結(jié)構(gòu)以完成病理檢查;透射電鏡觀察胃ICC超微結(jié)構(gòu);免疫熒光法定位胃ICC;免疫熒光法及原位雜交法分別檢測大鼠胃ICC內(nèi)Beclin1、微管相關(guān)蛋白1輕鏈3B(

3、microtubule-associated protein1 light chain3B，LC3B)蛋白及mRNA的表達。
　　結(jié)果:1.與正常對照組比較，模型組大鼠胃排空率降低(P＜0.01);與模型組比較，柴高組、柴中組大鼠胃排空率升高(P＜0.01);與柴中組比較，柴高組胃排空率升高(P＜0.05)，柴低組胃排空率下降(P＜0.05)。2.各組大鼠胃組織肉眼觀察均未見明顯糜爛及潰瘍，病理檢查各組大鼠胃組織均未見明顯炎性細胞

4、浸潤、結(jié)構(gòu)異常。3.正常對照組ICC內(nèi)線粒體結(jié)構(gòu)正常，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)豐富，偶見自噬泡;模型組、柴低組ICC內(nèi)細胞結(jié)構(gòu)出現(xiàn)異常，線粒體腫脹明顯，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)顆粒脫落，可見大量自噬泡;柴高組、柴中組ICC內(nèi)細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)未見明顯異常，線粒體腫脹不明顯，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)少量脫顆粒，僅見少量自噬泡。4.與正常對照組比較，模型組ICC內(nèi)Beclin1、LC3B蛋白及mRNA的表達均升高(P＜0.01);與模型組比較，柴高組、柴中組ICC內(nèi)Beclin1、LC3B

5、蛋白及mRNA的表達均下降(P＜0.01);與柴中組比較，柴高組ICC內(nèi)Beclin1、LC3B蛋白及mRNA的表達均下降(P＜0.05)，柴低組ICC內(nèi)Beclin1、LC3B蛋白及mRNA的表達均升高(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.FD大鼠胃動力障礙的機制可能與胃ICC內(nèi)發(fā)生過度自噬有關(guān)。2.柴胡疏肝散可能是通過抑制胃ICC過度自噬進而促進FD大鼠胃動力，其機制可能與下調(diào)Beclin1蛋白及mRNA的表達從而抑制細胞自噬活性