蘄艾鞣酸的提取分離、藥理研究和結(jié)構(gòu)鑒定.pdf

1、艾葉（Artemisiae argyi）為菊科（Asteraceae）蒿屬(Artemisia)植物，主要分布于亞洲東部地區(qū)，普遍生長于路旁荒野、草地。只要是向陽而排水順暢的地方就能生長，但以濕潤肥沃的土壤生長較好。本屬植物資源極其豐富，近年來研究發(fā)現(xiàn)該屬植物具有明顯的抗氧化、抗癌等藥理作用，引起了眾多學者對該屬植物研究的興趣。其中對艾葉（Artemisiae argyi）的研究比較廣泛，從該植物中分離得到了大量化學成分，并探索出各種活

2、性能力。
　　 本文以中藥艾葉為研究對象，探索提取艾葉鞣酸的最佳工藝方法，并測定了不同地區(qū)艾葉中總鞣酸的含量，研究了蘄艾鞣酸清除自由基的能力﹑體外凝血作用﹑以及抗腫瘤等藥理作用，并分析了蘄艾中的有效成分，鑒定其化合物的結(jié)構(gòu)。具體工作如下：
　　 1.采用超聲波法提取艾葉中鞣酸，通過四因素三水平正交試驗探討超聲波提取艾葉中鞣酸的最佳工藝條件，并對湖北蘄春、安徽霍山、山東鄄城、江西樟樹、河北安國五個產(chǎn)地艾葉中的總鞣酸含量進行

3、分析比較，結(jié)果表明在超聲溫度60℃,超聲功率150W，超聲時間20min，固液比1:25，丙酮：水4:6的條件下鞣酸的提取率最高，其中湖北蘄春的艾葉總鞣酸含量達到13.29％，是所有研究品種中含量最高的，說明蘄春作為艾葉的地道產(chǎn)地具有實驗依據(jù)。
　　 2.通過Fenton反應產(chǎn)生·OH，連苯三酚自氧化產(chǎn)生O2－?模型，采用紫外分光光度法，研究蘄艾總鞣酸體外清除自由基的能力，結(jié)果表明蘄艾總鞣酸在1.0～10.0mg/Ml范圍內(nèi)對羥

4、自由基和超氧陰離子自由基均具有清除作用，兩者均呈現(xiàn)明顯的量效關系， 最有效的清除濃度均為8.0mg/Ml，清除自由基能力均高于同等濃度的甘露醇，但低于同等濃度的抗壞血酸。
　　 3.通過MTT法在體外檢測不同濃度的蘄艾鞣酸對人肝癌細胞HepG2的細胞毒性作用，在此基礎上以大孔樹脂柱層析和薄層純化對蘄艾總鞣酸正丁醇部位提取分離，得到6個不同極性的鞣酸餾分，并通過MTT法比較不同極性的各提取物對肝癌細胞的增殖影響。其結(jié)果顯示蘄艾鞣酸

5、使體外培養(yǎng)的人肝癌細胞HepG2的凋亡細胞數(shù)增加，增值效率下降且呈濃度與時間的依賴關系。6個不同極性的提取物均具有抑制肝癌細胞生長的作用，其中40％甲醇部位對肝癌細胞的生長抑制作用最強，是蘄艾鞣酸體外抗肝癌主要的活性部位。
　　 4.將蘄春艾葉中不同組分按照傳統(tǒng)方法進行炮制或者提取分離，得到六個不同組分，分別為：5一叔丁基連苯三酚、艾炭、艾灰、艾葉揮發(fā)油、鞣酸和艾焦油，使用家兔對以上六個組分分別進行了體外凝血試驗，結(jié)果顯示蘄春艾