基于《內(nèi)經(jīng)》肝“生血?dú)狻崩碚撎接懻{(diào)肝生血法對復(fù)合病因貧血小鼠的補(bǔ)血效應(yīng).pdf

1、目的：
　　應(yīng)用調(diào)肝生血法，觀察小柴胡湯、當(dāng)歸補(bǔ)血湯、小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯、自擬柴胡生血方對失血加饑餓復(fù)合病因造模法制備的貧血小鼠的補(bǔ)血效應(yīng)，探討《黃帝內(nèi)經(jīng)》“肝生血?dú)狻崩碚?，為臨床治療貧血提供新的思路和方法，為“肝生血?dú)狻崩碚撎峁?shí)驗(yàn)研究依據(jù)。
　　方法：
　　1.對《中華醫(yī)典》中1000多種中醫(yī)古代醫(yī)籍有關(guān)“肝生血”理論的疏理和分析，總結(jié)歸納“肝生血”理論。
　　2.選取SPF級小鼠雌雄各半分籠飼養(yǎng)，將小鼠隨機(jī)

2、分為空白組、模型組、小柴胡湯組、當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、柴胡生血方組，用復(fù)合病因造模法制備貧血小鼠模型，周期14天。各治療組于第15天開始，每日進(jìn)行中藥湯劑灌胃，7天為1療程，共2個療程。①觀察血虛小鼠體重、體態(tài)改變；②分別于灌藥1周、2周后，每組隨機(jī)選取雌雄各4只小鼠采用摘眼球取血的方法取血，進(jìn)行外周血血常規(guī)檢測、采用Elisa法檢測小鼠血清細(xì)胞因子SCF、EPO、IL-3、TGF-β1、TNF-α含量；③處死動物摘取小鼠

3、肝臟、心臟、腦制作病理組織切片，觀察小鼠腦、心、肝組織缺血的病理改變，并評分統(tǒng)計。
　　結(jié)果：
　　1.體重變化：造模前、后，實(shí)驗(yàn)小鼠體重變化有顯著性差異（P＜0.01）；灌藥1周后，空白組和模型組比較，灌藥組和模型組比較，體重變化無顯著性差異（P＞0.05）；灌藥第2周后，與空白組比較，模型組體重小于空白組，有顯著性差異（P＜0.05），與模型組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、柴胡生血方組小鼠體重增重，差異有顯著

4、性意義（P＜0.05）。其余各組間的比較，空白組、模型組、當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、小柴胡湯組、小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯組5組小鼠的體重均小于柴胡生血方組小鼠體重，且差異有顯著性（P＜0.05）。
　　2.血常規(guī)結(jié)果：與模型組比較，各用藥組對外周血象有不同程度的提高，灌藥1周后，小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、小柴胡湯組小鼠血常規(guī)RBC、HGB含量顯著高于模型組（P＜0.05），灌藥2周后，小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯組RBC顯著高于模型組（P＜0.05），柴胡生血方

5、組HGB、WBC含量顯著高于模型組（P＜0.05）。
　　3.血清中細(xì)胞因子指標(biāo)檢測結(jié)果：
　　（1）灌藥1周后與模型組比較，小柴胡湯組、小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、柴胡生血方組EPO含量顯著增高（P＜0.05）；灌藥2周后與模型組比較，柴胡生血方組、小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯組EPO含量顯著增高（P＜0.05）；
　?。?）灌藥1周后與模型組比較，小柴胡湯組SCF含量顯著增高（P＜0.05）。其余各組間比較，差異無顯著性（P＞0.

6、05）。灌藥2周后各用藥組與模型組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　?。?）灌藥1周、2周后，與模型組比較，各灌藥組IL-3含量均高于模型組，但差異無顯著性意義（P＞0.05）。
　　（4）灌藥1周后與模型組比較，各用藥組TGF-β1含量均降低，小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、小柴胡湯TGF-β1含量顯著降低（P＜0.05），而在灌藥2周后與模型組比較，各灌藥組TGF-β1含量均降低，但只有柴胡生血方組TGF-β1顯著降低（

7、P＜0.05）。
　?。?）灌藥1周后與模型組比較，小柴胡湯組TNF-α含量顯著降低（P＜0.05）。灌藥2周后，與模型組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、小柴胡湯組、小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、柴胡生血方組TNF-α含量顯著降低（P＜0.05）。
　　4.腦、心、肝組織病理統(tǒng)計結(jié)果：造模后，腦、心、肝組織病理指標(biāo)中，只有肝臟組織病理指標(biāo)統(tǒng)計有顯著性差異（P＜0.01），灌藥1周、2周后，與模型組比較，當(dāng)歸補(bǔ)血湯組、小柴胡湯組、柴胡生血方組、小

8、柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯組病變程度及病變積分顯著降低(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.肝生血是肝應(yīng)春生之氣，有促生、催生及生發(fā)作用，能助他臟以生血。肝可以通過應(yīng)生發(fā)之機(jī)，調(diào)節(jié)各臟腑生血功能，從而協(xié)助各臟腑完成血的生成。
　　2.柴胡生血方對小鼠體重改善作用明顯；在生血效應(yīng)中，小柴胡湯表現(xiàn)為早期的促生血作用，小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯生血效應(yīng)持續(xù)，柴胡生血方在灌藥第二周后生血效應(yīng)明顯且對促WBC成生效果強(qiáng)于其余用藥組，當(dāng)歸補(bǔ)血湯生

9、血效果不及小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯與柴胡生血方。
　　3.本造模方法得到的復(fù)合病因貧血小鼠模型對腦、心組織的病理影響不大，在組織缺血時，肝臟比心、腦組織敏感。在灌藥后，幾個補(bǔ)血藥均對貧血小鼠肝臟病理缺血狀態(tài)有所改善。
　　4.小柴胡湯早期促生血作用機(jī)制可能與小柴胡湯率先促進(jìn)干細(xì)胞分化早期細(xì)胞因子SCF表達(dá)、顯著降低TNF-α表達(dá)有關(guān)；小柴胡湯、柴胡生血湯、小柴胡合當(dāng)歸補(bǔ)血湯可顯著促進(jìn)EPO、抑制TGF-β1、TNF-α表達(dá)。