低溫型木霉菌的分類鑒定及其對辣椒疫霉抑制作用的研究.pdf

1、木霉菌(Trichoderma Pers.:Fr.)是一類普遍存在于土壤中的真菌，其有性型屬于肉座菌屬(Hypocrea Fr.)。一些木霉菌是重要的生防菌，已廣泛運用于土傳病害的防治。辣椒疫病(Pepper blight)是典型的土傳病害，病原菌是辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),病原菌生長繁殖主要發(fā)生在低、中溫范圍。病害發(fā)生溫度范圍為16-32℃，其游動孢子囊萌發(fā)和釋放的溫度范圍為16-26C。針對病原菌生物學

2、特性，選擇適宜低溫條件下生長的生防菌，能更有效的防治辣椒疫霉菌。而一般用于防治辣椒疫病的生防菌為常溫條件下的木霉菌。為此，從不同常年低溫的山頂?shù)貐^(qū)采集和分離的木霉菌，進行多樣性資源進的調查研究，同時利于獲得的木霉菌株用于篩選對辣椒疫霉菌的有拮抗作用的木霉菌。
　　 對中國湖南張家界、山東泰山和陜西太白山山頂?shù)貐^(qū)的木霉菌種類進行了研究，明確溫度、海拔和植被對木霉種類分布的影響。采集共36份土樣，分離出248株木霉菌株，同時，篩選處

3、理拮抗辣椒疫霉菌的生防菌株。真菌鑒定采用形態(tài)學和分子系統(tǒng)學相結合的方法。形態(tài)學觀察是不同培養(yǎng)基上進行的。在CMD培養(yǎng)基上培養(yǎng)的木霉菌主要用于觀察分生孢子、分生孢子梗和產孢瓶梗; PDA和CMD培養(yǎng)基用于觀察菌落特征，培養(yǎng)條件都是在20℃光暗交替條件下培養(yǎng)的。分子系統(tǒng)學是依據ITS和Tef1序列進行的。形態(tài)學和系統(tǒng)學結合鑒定的結果顯示，來自張家界的91株木霉菌株，具有9個種，分別為（T.atroviride，T.koningii，T.lo

4、ngipile,T.asperellum,T.koningiopsis,T.hamatum,T.harzianum,T.cerinum,T.viride);太白山共分離獲得75株木霉菌株，僅3個種(T.viridescens，T.oblongisporum，T.polysporum);泰山共分離獲得82株木霉菌株，共6個種(T.konigii，T.koningiopsis，T.atroviride，T.hamatum，T.cerinum

5、，T.viride)。另外，有4個分離系待鑒定。
　　 通過研究木霉菌對辣椒疫病的拮抗作用，及其代謝物對其抑制作用，結果顯示，篩選出拮抗效果好的菌株23株（拮抗效果為1），其中來自張家界有9株[T.atroviride(TZ0108,TZ0305,TZ0602,TZ0603,TZ0210),T.asperellum(TZ0103),T.harzianum(TZ0402，TZ0403)， T.viridescens(TZ0604)

6、];泰山有7株[T.viridescens(TT0501,TT0506,TT0803,TT0805),T.konigiopsis(TT0302,TT0402,TT1001)];太白山有7株，分別為[T.viridescens(TS0606，TS0904，TS1105，TS0606，TS0904)，T.oblongisporum(TS1201，TS1203)]。篩選出產生活性代謝物完全抑制辣椒疫霉生長的共33個菌株，其中張家界有13株，分

7、別為T.atroviride(TZ0209，TZ0702, TZ0704, TZ0710, TZ1102, TZ1106, TZ1107, TZ1202, TZ1205, TZ0210),T.viridescens(TZ1003，TZ1005，TZ1204);泰山有7株，分別為T.viridescens(TT0501,TT0508,TT0604, TT0606, TT0906),T.hamatum(TT0108,TT0401)，太白山有

8、13株，分別為T.viridescens(TS0102，TS0207，TS0404，TS0405，TS0504，TS0602, TS0603, TS0910, TS0911, TS1103, TS0606, TS0904), T.polysporum(TS1106)。比較木霉菌的拮抗作用和抑制作用，擁有兩個拮抗機制的菌株4個。分別是T.atroviride(TZ0201，來自張家界)，T.viridescens(TS0606和TS090