低溫型木霉菌的分類鑒定及其對(duì)辣椒疫霉抑制作用的研究.pdf

1、木霉菌(Trichoderma Pers.:Fr.)是一類普遍存在于土壤中的真菌，其有性型屬于肉座菌屬(Hypocrea Fr.)。一些木霉菌是重要的生防菌，已廣泛運(yùn)用于土傳病害的防治。辣椒疫病(Pepper blight)是典型的土傳病害，病原菌是辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici),病原菌生長(zhǎng)繁殖主要發(fā)生在低、中溫范圍。病害發(fā)生溫度范圍為16-32℃，其游動(dòng)孢子囊萌發(fā)和釋放的溫度范圍為16-26C。針對(duì)病原菌生物學(xué)

2、特性，選擇適宜低溫條件下生長(zhǎng)的生防菌，能更有效的防治辣椒疫霉菌。而一般用于防治辣椒疫病的生防菌為常溫條件下的木霉菌。為此，從不同常年低溫的山頂?shù)貐^(qū)采集和分離的木霉菌，進(jìn)行多樣性資源進(jìn)的調(diào)查研究，同時(shí)利于獲得的木霉菌株用于篩選對(duì)辣椒疫霉菌的有拮抗作用的木霉菌。
　　 對(duì)中國(guó)湖南張家界、山東泰山和陜西太白山山頂?shù)貐^(qū)的木霉菌種類進(jìn)行了研究，明確溫度、海拔和植被對(duì)木霉種類分布的影響。采集共36份土樣，分離出248株木霉菌株，同時(shí)，篩選處

3、理拮抗辣椒疫霉菌的生防菌株。真菌鑒定采用形態(tài)學(xué)和分子系統(tǒng)學(xué)相結(jié)合的方法。形態(tài)學(xué)觀察是不同培養(yǎng)基上進(jìn)行的。在CMD培養(yǎng)基上培養(yǎng)的木霉菌主要用于觀察分生孢子、分生孢子梗和產(chǎn)孢瓶梗; PDA和CMD培養(yǎng)基用于觀察菌落特征，培養(yǎng)條件都是在20℃光暗交替條件下培養(yǎng)的。分子系統(tǒng)學(xué)是依據(jù)ITS和Tef1序列進(jìn)行的。形態(tài)學(xué)和系統(tǒng)學(xué)結(jié)合鑒定的結(jié)果顯示，來(lái)自張家界的91株木霉菌株，具有9個(gè)種，分別為（T.atroviride，T.koningii，T.lo

4、ngipile,T.asperellum,T.koningiopsis,T.hamatum,T.harzianum,T.cerinum,T.viride);太白山共分離獲得75株木霉菌株，僅3個(gè)種(T.viridescens，T.oblongisporum，T.polysporum);泰山共分離獲得82株木霉菌株，共6個(gè)種(T.konigii，T.koningiopsis，T.atroviride，T.hamatum，T.cerinum

5、，T.viride)。另外，有4個(gè)分離系待鑒定。
　　 通過研究木霉菌對(duì)辣椒疫病的拮抗作用，及其代謝物對(duì)其抑制作用，結(jié)果顯示，篩選出拮抗效果好的菌株23株（拮抗效果為1），其中來(lái)自張家界有9株[T.atroviride(TZ0108,TZ0305,TZ0602,TZ0603,TZ0210),T.asperellum(TZ0103),T.harzianum(TZ0402，TZ0403)， T.viridescens(TZ0604)

6、];泰山有7株[T.viridescens(TT0501,TT0506,TT0803,TT0805),T.konigiopsis(TT0302,TT0402,TT1001)];太白山有7株，分別為[T.viridescens(TS0606，TS0904，TS1105，TS0606，TS0904)，T.oblongisporum(TS1201，TS1203)]。篩選出產(chǎn)生活性代謝物完全抑制辣椒疫霉生長(zhǎng)的共33個(gè)菌株，其中張家界有13株，分

7、別為T.atroviride(TZ0209，TZ0702, TZ0704, TZ0710, TZ1102, TZ1106, TZ1107, TZ1202, TZ1205, TZ0210),T.viridescens(TZ1003，TZ1005，TZ1204);泰山有7株，分別為T.viridescens(TT0501,TT0508,TT0604, TT0606, TT0906),T.hamatum(TT0108,TT0401)，太白山有

8、13株，分別為T.viridescens(TS0102，TS0207，TS0404，TS0405，TS0504，TS0602, TS0603, TS0910, TS0911, TS1103, TS0606, TS0904), T.polysporum(TS1106)。比較木霉菌的拮抗作用和抑制作用，擁有兩個(gè)拮抗機(jī)制的菌株4個(gè)。分別是T.atroviride(TZ0201，來(lái)自張家界)，T.viridescens(TS0606和TS090