CFTR和AQP1在卵巢過度刺激綜合征體液滲透中的協(xié)同作用研究.pdf

1、第一部分，腹腔間皮CFTR和AQP1在雌激素誘導(dǎo)的大鼠卵巢過度刺激綜合征體液滲出中的作用
　　 目的:
　　 建立雌激素誘導(dǎo)的卵巢過度刺激綜合征(Ovarianhyperstimulationsyndrome，OHSS)大鼠動物模型，觀察OHSS發(fā)生過程中雌激素對囊性纖維化蛋白調(diào)節(jié)體(Cysticfibrosistransmembraneconductanceregulator，CFTR)和水通道蛋白1(Aquapori

2、n1，AQP1)在腹腔間皮細(xì)胞表達(dá)和功能的影響，進(jìn)一步明確在OHSS發(fā)生過程中功能增強(qiáng)的腹腔間皮細(xì)胞CFTR和AQP1在腹腔積液滲透性增加中的作用。
　　 材料和方法:
　　 選取成年SD大鼠，應(yīng)用孕馬血清(Pregnantmares'serumgonadotrophin，PMSG)結(jié)合人絨毛膜促性腺素（Humanchorionicgonadotropin，hCG）注射，成功建立雌激素誘導(dǎo)的OHSS大鼠動物模型，同時建立

3、卵巢去勢大鼠模型。分離純化腹腔間皮細(xì)胞，應(yīng)用Westernblot的方法檢測CFTR和AQP1在腹腔間皮細(xì)胞的表達(dá)。應(yīng)用放射免疫法檢測處于不同性周期階段的正常大鼠及OHSS大鼠的雌激素水平，應(yīng)用短路電流技術(shù)測定OHSS大鼠和不同性周期階段正常大鼠腹腔間皮細(xì)胞CFTR通道功能情況。
　　 結(jié)果:
　　 PMSG/hCG可以成功誘導(dǎo)大鼠OHSS的發(fā)生，并出現(xiàn)體重增加、胸水和腹水等相關(guān)癥狀，同時腹腔間皮細(xì)胞表達(dá)CFTR和AQP

4、1明顯上調(diào)。此外，檢測到OHSS大鼠雌激素水平明顯增加，卵巢去勢大鼠雌激素注射可以明顯促進(jìn)OHSS癥狀的發(fā)生;孕激素注射則不能促進(jìn)OHSS癥狀的發(fā)生，還可以抑制雌激素誘導(dǎo)的OHSS。雌激素可以上調(diào)CFTR和AQP1在腹腔間皮細(xì)胞的表達(dá)，而孕激素則可以抑制雌激素誘導(dǎo)的表達(dá)上調(diào)。短路電流實驗證實，正常大鼠在動情期CFTR通道功能增加，OHSS大鼠CFTR通道功能顯著增加。
　　 結(jié)論:
　　 OHSS大鼠腹腔間皮細(xì)胞CFTR

5、和AQP1表達(dá)和功能明顯增強(qiáng)。雌激素可以誘導(dǎo)卵巢去勢大鼠OHSS發(fā)生和促進(jìn)腹腔間皮細(xì)胞CFTR和AQP1表達(dá)上調(diào)。
　　 第二部分，基于CFTR和AQP1的OHSS治療的動物實驗研究
　　 目的:
　　 建立雌激素誘導(dǎo)的卵巢過度刺激綜合征(Ovarianhyperstimulationsyndrome，OHSS)大鼠動物模型，觀察CFTR(Cysticfibrosistransmembraneconductanc

6、eregulator，CFTR)和AQP1(Aquaporin1，AQP1)表達(dá)的下調(diào)或抑制其功能對OHSS癥狀的影響。
　　 材料和方法:
　　 選取成年SD大鼠，應(yīng)用孕馬血清(Pregnantmares'serumgonadotrophin，PMSG)結(jié)合人絨毛膜促性腺素（Humanchorionicgonadotropin，hCG）注射，成功建立雌激素誘導(dǎo)的OHSS大鼠動物模型。觀察孕激素注射以及米非司酮灌胃對大鼠

7、OHSS癥狀的影響，進(jìn)一步了解孕激素在OHSS發(fā)生發(fā)展中的作用，以及對腹腔間皮CFTR和AQP1表達(dá)和功能的影響。應(yīng)用短路電流技術(shù)觀察AQP1抑制劑HgCl2對腹腔間皮CFTR功能的影響。最后應(yīng)用CFTR抗血清和AQP1抗血清進(jìn)行OHSS大鼠腹腔灌洗，了解CFTR和AQP1功能被抑制之后大鼠OHSS癥狀的緩解情況。
　　 結(jié)果:
　　 孕激素可以明顯抑制腹腔間皮CFTR和AQP1的功能和緩解大鼠OHSS癥狀，而孕激素抑制

8、劑米非司酮則可以拮抗孕激素的這種作用。Westernblot結(jié)果證實，孕激素可以抑制OHSS大鼠CFTR和AQP1表達(dá)上調(diào)，米非司酮則可以抑制孕激素的這種作用。短路電流結(jié)果進(jìn)一步證實，AQP1抑制劑HgCl2可以抑制腹腔間皮CFTR功能，CFTR抗血清和AQP1抗血清均可以緩解大鼠OHSS癥狀。
　　 結(jié)論:
　　 孕激素抑制CFTR和AQP1的表達(dá)和活性緩解大鼠OHSS癥狀。CFTR抗血清和AQP1抗血清協(xié)同抑制大鼠O