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文檔簡介
1、目的:研究不同劑量的熊果酸(UA)對IL-6誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞C-反應(yīng)蛋白(CRP)異常表達(dá)的抑制作用,及對由CRP所致的血管內(nèi)皮炎癥損傷的保護(hù)作用。
方法:1.熊果酸抑制肝臟細(xì)胞合成CRP的研究:(1)實驗分為對照組、IL-6(20 ng/mL)組、UA低中高濃度(6.5,12.5,25μmol/L)與20ng/mLIL-6共同作用組。藥物作用于HepG2細(xì)胞48h后,MTT法檢測UA對IL-6作用后的HepG2細(xì)胞活
2、力的影響。(2)采用Western blot法及RT-PCR法檢測HepG2細(xì)胞CRP蛋白和mRNA表達(dá)情況。2.熊果酸對CRP致臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用的研究:實驗分對照組、CRP(25μg/mL)組、UA低中高濃度(5,10,20μmol/L)與CRP(25μg/mL)共同作用組。(1)細(xì)胞加藥后培養(yǎng)24h,MTT法檢測UA對CRP作用后的HUVEC細(xì)胞增殖力的影響;(2)采用Western blot法及RT-PCR法檢測HUV
3、EC的VCAM-1和LOX-1的蛋白及mRNA表達(dá)。
結(jié)果:1.UA抑制肝臟合成CRP的研究結(jié)果顯示:與對照組比較,IL-6組細(xì)胞活力明顯降低(P<0.01),UA組(12.5,25μmol/L)較IL-6組細(xì)胞活力增高(P<0.01);Western blot及RT-PCR結(jié)果表明,與對照組比較,IL-6可以促進(jìn)HepG2細(xì)胞CRP蛋白和mRNA表達(dá)增加,IL-6的這種促進(jìn)CRP表達(dá)增高的作用可以被UA(6.25,12.
4、5,25μmol/L)所抑制(P<0.01),且抑制作用呈劑量依賴性。2.UA對CRP致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用的研究結(jié)果顯示:與對照組比較,CRP能顯著促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖(P<0.01),與CRP單獨作用組比較,UA(10,20μmol/L)能顯著抑制CRP引起的內(nèi)皮細(xì)胞增殖作用(P<0.01,P<0.01);Western blot及RT-PCR結(jié)果表明,CRP可誘導(dǎo)HUVEC高度表達(dá)VCAM-1蛋白及mRNA,CRP的這種作用可被
5、UA(10,20μmol/L)顯著抑制(P<0.01,P<0.01),抑制作用有劑量依賴性。CRP可誘導(dǎo)HUVEC高表達(dá)LOX-1蛋白,這種作用可被UA(5,10,20μmol/L)顯著抑制(P<0.01,P<0.01,P<0.01),抑制作用呈劑量依賴性。
結(jié)論:UA能有效抑制肝臟合成CRP,并能抑制CRP誘導(dǎo)的HUVEC表達(dá)VCAM-1,LOX-1。推測UA可能通過抑制肝臟合成炎癥因子CRP而降低血液中CRP濃度,并降
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