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文檔簡介
1、目的:1觀察不同濃度尿酸鹽對人血管內(nèi)皮細胞損傷相關因子表達的影響,明確高尿酸血癥對人內(nèi)皮細胞的損傷是直接作用還是通過單核細胞釋放炎癥因子的間接作用。 方法:體外培養(yǎng)人血管內(nèi)皮細胞并將內(nèi)皮細胞與單核細胞共培養(yǎng),對照組不用尿酸鹽刺激,刺激組分別用395μ mol/L(低2),789μmol/L(低1),1184μ mol/L(中),1579μ mol/L(高1),1974μ mol/L(高2)等不同濃度尿酸鹽刺激血管內(nèi)皮細胞48小時
2、,用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA)測定上清液白細胞介素1(IL-l)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、細胞間粘附分子-1(ICAM-1)、血漿纖溶酶原激活抑制劑-1( PAI-1)等因子表達水平,用逆轉錄-聚合酶鏈式反應(RT- PCR)技術測定血管內(nèi)皮細胞人尿酸鹽轉運子(hUAT) mRNA的表達。 結果:①IL-1、TNF-α的表達:內(nèi)皮細胞組:二者的表達在中、高1、高2濃度組與對照組比有明顯升高,有顯著性差異(P<0
3、.05),共培養(yǎng)組上述趨勢更顯著;②ICAM-1的表達:內(nèi)皮細胞組:ICAM-1表達在高2濃度組與對照組比較有明顯升高,有顯著性差異(P<0.05),共培養(yǎng)組:高1、高2濃度組與對照組比較均可見有意義的ICAM-1表達(P<0.05);③PAI-1的表達:內(nèi)皮細胞組:PAI-1的表達在高1、高2濃度組與對照組相比有明顯升高,有顯著性差異(P<0.05),共培養(yǎng)組:在中、高1、高2濃度組與對照組比較均可見有意義的PAI-1表達(P<0.0
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