鵝血蛋白組分對胃癌細胞增殖的影響.pdf

1、胃癌(Gastric cancer，GC)為世界上多發(fā)的消化方面惡性腫瘤，給人民身心健康帶來了巨大危害。胃癌的全世界惡性腫瘤發(fā)病率及死亡率的排名仍然處于前列。近幾年，我國惡性腫瘤中胃癌的發(fā)病率及死亡率均處于第三位，給社會和家庭帶來了沉重的經濟負擔。進展期胃癌的生存率低，可能與醫(yī)治中的并發(fā)癥、毒副作用和耐藥性等方面有關。所以探尋毒性低、效果顯著的抗腫瘤藥值得期待。
　　臨床上普遍使用的一些抗腫瘤中藥，毒性低且效果顯著。植物藥抗腫瘤的

2、主要成分經證實通常是多糖、短肽及黃酮類等化合物；而動物藥的主藥成分為短肽，包括毒素和抗菌肽（Antimicrobial peptides，AMPs），毒素的作用機制主要為通過短肽誘導細胞凋亡，同時動物體內分泌的多種抗菌肽具有抑制細胞生長的效果。因此，從已知中藥出發(fā)，分離其中有效活性成分來研發(fā)安全高效的抗腫瘤藥物潛力巨大。
　　鵝血(Goose blood)屬于中醫(yī)動物藥范疇，是中醫(yī)治療胃癌常用的成分之一。由于尚無鵝血醫(yī)治胃癌的正式

3、文獻報道，因此我們擬觀察鵝血有效組分中多肽和蛋白質對胃癌細胞體外增殖的影響。
　　目的：探討鵝血有效蛋白組分對胃癌細胞增殖的影響，并通過質譜鑒定初步了解鵝血有效組分的多肽和蛋白組成及其功能。
　　方法：
　　1.取鵝血清，使用30 kD和10 kD超濾管分級分離鵝血有效成分，再取部分10 kD鵝血有效成分，進一步使用3 kD超濾管分離鵝血中小分子多肽成分，并對鵝血各組分中蛋白定量分析。
　　2.取培養(yǎng)獲得的處于對

4、數生長期的人胃癌細胞株HGC-27和SGC-7901備用，分別加入各組鵝血蛋白組分、陽性對照化療藥5-FU、空白對照作用36小時后，用MTS法算出鵝血各蛋白分組的生長抑制率。
　　3.對有效鵝血蛋白組分溶液內酶解20小時后，采集和分析提取出的酶解多肽，質譜鑒定有效鵝血蛋白組分的構成。
　　結果：
　　1.鵝血蛋白各分組都具有抑制人胃癌細胞株的效果，各分組間效果不同。
　　2.30 kD組和10 kD組均表現良好的

5、抑制效果，較3 kD組作用更加顯著，其中10 kD組的生長抑制率分別為41.37％±5.94%（P<0.05）和12.05%±9.03%（P<0.05）；與陽性對照的化療藥5-FU組的生長抑制率65.46%±10.40%（P<0.05）和78.27%±4.08%（P<0.05），其作用稍弱。結果提示，鵝血清中起作用的蛋白組分大多集中在10 kD組。
　　3.10 kD組10倍稀釋后，其對胃癌細胞的生長抑制作用效果不夠明顯，表明其作

6、用方式比較溫和。
　　4.質譜分析鵝血清中10 kD組，以進一步了解可能起作用的蛋白組分。質譜分析的結果表明，共獲得135個蛋白或多肽，其中功能已知的蛋白為60個，與其他物種有類似功能結構域的蛋白48個和未知蛋白27個，參照物種相近的綠頭鴨（ Anas platyrhynchos）的基因信息獲取鵝血大部分蛋白或多肽序列。通過質譜獲得的所有蛋白的氨基酸數目在43~3201個之間，其中小于130個氨基酸的有19個蛋白或多肽。該組分獲得