抗IL-6R單抗對內(nèi)毒素所致早期ALI保護(hù)作用的實驗研究.pdf

1、目的: 觀察抗IL-6R單抗對內(nèi)毒素所致大鼠早期急性肺損傷(acute lung injury，ALI)的作用，比較抗IL-6R單克隆抗體和激素在ALI模型中的抗炎作用和治療作用。探討NF-kB、IL-6、TNF-a在抗IL-6R單抗干預(yù)ALI大鼠肺組織中表達(dá)。 方法: 40只SD大鼠隨機分為5組，每組8只。正常對照組(A組)：腹腔注入生理鹽水1ml；ALI組(B組)：從腹腔注射內(nèi)毒素(LPS)8mg/kg制備A

2、LI模型，正式實驗誘發(fā)ALI前12小時，將1/10內(nèi)毒素劑量先行給予，12小時后再給予余下的劑量；ALI+激素組(C組)：內(nèi)毒素給予同B組，在第二次給予內(nèi)毒素同時腹腔注射地塞米松2mg/l(g；ALI+抗IL-6R單抗組(D組)：內(nèi)毒素給予同B組，在第二次給予內(nèi)毒素同時腹腔注射抗IL-6R單抗200μg/kg；ALI+Rabbit IgG組(E組)：在第二次給予內(nèi)毒素同時腹腔注射Rabbit IgG 200μg/kg。第二次給予內(nèi)毒素后

3、4h處死大鼠。左肺行肺泡灌洗(BAL)，右肺取二葉稱重后烘干，一葉肺留取病理標(biāo)本；分別測定肺濕/干重比(W/I))、支氣管肺泡灌洗液(BALF)總細(xì)胞計數(shù)、中性粒細(xì)胞計數(shù)、蛋白濃度變化；酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)測定血清和BALF中IL-6、TNF-α的含量；光鏡觀察并盲法評分比較肺組織病理學(xué)改變；免疫組化法檢測組織中IL-6、TNF-α、NF-kB表達(dá)的變化。 結(jié)果: (1)ALI組(B組)組和ALI+Rabbit I

4、gG組(E組)BALF中細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞百分比均高于NS組(P<0.05)，而ALI+激素組(C組)和ALI+抗IL-6R單抗組(D組)中性粒細(xì)胞百分比明顯低于ALI組(P<0.05)。 (2)ALI組(B組)和ALI+Rabbit IgG組(E組)中蛋白濃度和肺W/D均明顯高于NS組（P<0.05)；而ALl+激素組(C組)和ALI+抗IL-6R單抗組(D組)BALF中蛋白濃度肺W/D明顯小于ALI組(B組)和ALI+Ra

5、bbit IgG組(E組)(P<0.05)。 (3)．ALI組(B組)組和ALI+Rabbit IgG組(E組)血清和BALF中IL-6、TNF-ct含量顯著高于NS組(P<0.05)。而ALI+抗IL-6R．單抗組(D組)分別和ALI組(B組)、ALI+Rabbit IgG組(E組)比較，血清和BALF中IL-6、TNF-G含量無顯著差異。 肺大體病理顯示： ALI組(B組)和ALI+Rabbit IgG組(E

6、組)肺體積增大，明顯水腫，肺表面可見點灶狀出血，光鏡下觀察均可見肺間質(zhì)及肺泡腔水腫、滲出、出血等病理變化；ALI+抗IL-6R單抗組(D組)和ALI+激素組(C組)肺泡腔水腫、滲出、粒細(xì)胞浸潤程度要輕于ALI組(B組）和ALI+Rabbit IgG組(E組)。 結(jié)論: 1、抗IL-6R單抗在LPS所致大鼠ALI模型上，具有抑制中性粒細(xì)胞在肺中的滲透、積聚，減輕間質(zhì)及肺泡水腫和出血的作用。 2、抗IL-6R單抗對A