乳酸片球菌S204益生特性、發(fā)酵及噴霧干燥工藝的研究.pdf

1、長(zhǎng)期使用抗生素導(dǎo)致了諸多問(wèn)題，許多國(guó)家早已限制在飼料添加劑中抗生素的使用。在此背景下，無(wú)毒副作用的益生菌得到了廣泛關(guān)注。乳酸片球菌是具有益生效果的腸道益生菌，利用乳酸片球菌代替抗生素對(duì)畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。但是益生菌的活性會(huì)受外界環(huán)境的溫度、濕度、pH值等的影響，當(dāng)處于不利條件下時(shí)會(huì)大量死亡，導(dǎo)致其不能充分發(fā)揮對(duì)宿主產(chǎn)生的有益作用。本研究對(duì)乳酸片球菌的體外益生特性、發(fā)酵工藝及噴霧干燥工藝進(jìn)行了研究。具體研究結(jié)果如下:
　

2、　對(duì)實(shí)驗(yàn)室保藏的菌種進(jìn)行菌落形態(tài)和16S rRNA基因保守序列分析，鑒定該菌株為乳酸片球菌，將其命名為乳酸片球菌S204(Pediococcus acidilactici S204)。從P.acidilactici S204的抑菌能力及其對(duì)高溫、模擬胃液、豬膽鹽、抗生素耐受性等方面研究其益生特性。結(jié)果表明該菌株對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)均有抑制作用;55℃處理20min時(shí)活菌數(shù)數(shù)量級(jí)沒(méi)有變化;60℃處理10min時(shí)活菌數(shù)下降約3個(gè)

3、數(shù)量級(jí)，20min時(shí)活菌數(shù)降至0。耐受pH2.5的模擬胃液達(dá)1h時(shí)存活率66.17％，2h時(shí)存活率17.95％;對(duì)0.1％-0.5％的豬膽鹽表現(xiàn)出良好的耐受性;對(duì)青霉素敏感，對(duì)氨芐西林、諾氟沙星、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、萬(wàn)古霉素有耐藥性。
　　采用單因素實(shí)驗(yàn)對(duì)乳酸片球菌S204的發(fā)酵工藝進(jìn)行優(yōu)化。得到的培養(yǎng)基組分為葡萄糖6％，酵母浸粉6％，MnSO4·H2O0.02％，MgSO4·7H2O0.04％，無(wú)水乙酸鈉0.5％，檸檬酸銨0.2

4、％，K2HPO40.2％,吐溫-800.1％。發(fā)酵條件:培養(yǎng)基初始pH6.5，接種量5％，37℃下靜置培養(yǎng)。該菌株在此培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件下培養(yǎng)15h時(shí)活菌數(shù)可達(dá)到7.9×109cfu/mL。用5L發(fā)酵罐進(jìn)行放大實(shí)驗(yàn)，裝液量1.5L，葡萄糖6％，酵母浸粉6％。發(fā)酵過(guò)程通過(guò)流加堿液調(diào)控pH為6.5，并補(bǔ)加70g的葡萄糖和70g的酵母浸粉，發(fā)酵15h時(shí)活菌數(shù)可達(dá)2.72×1010cfu/mL。
　　采用單因素實(shí)驗(yàn)對(duì)乳酸片球菌S204的噴霧