缺血預(yù)處理介導(dǎo)抗凋亡對缺血再灌注腎損傷模型鼠腎臟的保護(hù)作用.pdf

1、目的：
　　研究凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、PDCD4在缺血再灌注腎損傷、缺血預(yù)處理模型鼠腎臟中的表達(dá)變化，探討缺血預(yù)處理對腎臟的保護(hù)機(jī)制。
　　方法：
　　將雄性C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為5個大組：對照組（C組），假手術(shù)組（S組），缺血再灌注組（IR組），預(yù)缺血處理缺血再灌注模型組（IPC+IR組）,假性預(yù)缺血處理組(S+IR組)；除對照組外，其余4組根據(jù)再灌注的時間分亞組（再灌注后0h，3h，6h，12h，2

2、4h，48h，3d，5d，7d）；采用夾閉小鼠雙側(cè)腎蒂30 min后進(jìn)行再灌注建立小鼠缺血再灌注腎損傷模型；微型動脈夾夾閉小鼠雙側(cè)腎蒂15min的方法進(jìn)行預(yù)缺血干預(yù)，4天后再夾閉雙側(cè)腎蒂30min后進(jìn)行再灌注建立缺血預(yù)處理干預(yù)模型。全自動生化分析儀檢測血肌酐、尿素氮水平；HE染色觀察腎臟病理損害，腎小管間質(zhì)病理損害評分計量腎臟病理損害程度；TUNEL免疫熒光染色法(原位末端標(biāo)記法）檢測腎小管上皮細(xì)胞凋亡；RT-PCR、免疫組織化學(xué)染色法

3、分別檢測小鼠腎組織Bax、Bcl-2、PDCD4 mRNA、蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.與假手術(shù)組、缺血預(yù)處理組比較，IR組缺血再灌注后血Scr、BUN、腎臟病理損害評分逐漸加重，再灌注24h達(dá)到峰值，各亞組之間具有顯著性差異（P均<0.01）；腎組織Bax、Bcl-2、PDCD4 mRNA表達(dá)急劇上升，分別于6h、24h、12h到達(dá)峰值，各亞組間比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均<0.01）；腎組織Bax、Bcl-2、P

4、DCD4蛋白質(zhì)的表達(dá)水平分別于6h、6h、12h到達(dá)峰值，各亞組間比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P均<0.05）；TUNEL免疫熒光染色顯示對照組、假手術(shù)組小鼠腎小管上皮未見明顯的凋亡細(xì)胞；缺血再灌注組在再灌注后腎小管上皮細(xì)胞凋亡數(shù)逐漸增多，再灌注后24 h達(dá)到峰值（25.07±2.29）％；
　　2.預(yù)缺血處理組腎臟病理損害明顯減輕，Bax、Bcl-2、PDCD4mRNA及蛋白質(zhì)表達(dá)水平、細(xì)胞凋亡明顯低于IR組及S+IR組（P均<0.05