富勒醇對人髓系白血病K562細胞增殖和凋亡作用的研究.pdf

1、白血病是一類造血干細胞異常的克隆性惡性疾病。大部分臨床化療藥對正常細胞和腫瘤細胞缺乏選擇性，在殺傷腫瘤細胞的過程中會損傷人體的正常組織細胞，引起嚴重的毒副作用，并產生耐藥性。水溶性多羥基富勒醇C60(OH)n和Gd@C82(OH)n(18≤n≤24)由于其獨特的化學結構和物理性質受到廣泛關注，在生物醫(yī)學領域具有良好應用潛力。迄今為止國內外尚無文獻報到富勒醇對白血病細胞系作用。本文擬從富勒醇對血清白蛋白相互作用和富勒醇對人源慢性髓系白血病

2、K562細胞增殖和凋亡等方面展開研究工作。其具體內容如下:
　　第一部分綜述了富勒烯衍生物的性質及對各種腫瘤細胞的作用，闡明了富勒烯衍生物的潛在抗腫瘤活性和可能作用機制，以及富勒烯衍生物在光動力治療和藥物輸送系統(tǒng)中的獨特應用，進一步證明了富勒烯衍生物納米顆粒在腫瘤治療中具有潛在的應用前景。同時指出，目前富勒烯衍生物在臨床或生物醫(yī)學領域上所面臨的挑戰(zhàn)性問題。
　　第二部分利用紫外-可見(UV-vis)光譜與熒光(FL)光譜法，

3、采用Stern-Volmer方程，Lineweavei-Burk雙倒數方程和雙對數回歸曲線模型，研究在不同溫度下內嵌金屬富勒醇Gd@C82(OH)n與血清白蛋白間結合作用的熒光行為，分別計算結合常數、結合位點和作用距離等，明確了富勒醇對血清白蛋白的熒光的猝滅作用機理為動態(tài)猝滅和靜態(tài)猝滅協(xié)同作用的結果。低濃度下富勒醇與血清白蛋白以11結合形成基態(tài)復合物，且主要為靜態(tài)猝滅，可能發(fā)生非輻射能量轉移，推斷出富勒醇與BSA之間主要為靜電引力，而與

4、HSA的作用力主要為范德華力和氫鍵。從三維熒光光譜與三維等高線剖面圖研究發(fā)現富勒醇與血清白蛋白的反應引起蛋白質熒光猝滅和構象變化。同步熒光光譜表明，富勒醇BSA結合位點位于酪氨酸(Tyr)殘基，而HSA分子的結合位點主要在色氨酸(Trp)殘基上，兩者均引起血清白蛋白構象的變化。進一步建立富勒醇血清白蛋白結合率的理論模型，預測藥物與蛋白結合率隨著濃度的變化而處于動態(tài)變化，且富勒醇與BSA結合率明顯大于HSA，受溫度影響較大。
　　第

5、三部分觀察富勒醇C60(OH)n對慢性髓系白血病K562細胞的生物學特性的影響，如細胞增殖、周期以及凋亡等。初步結果顯示:1）C60(OH)n干預K562細胞48h后，抑制增殖效果開始顯現，且相對比較穩(wěn)定，即C60(OH)n的濃度低于60μmol/L時對K562細胞有促進增殖的作用，高濃度（80～320μmol/L）時C60(OH)n明顯抑制K562細胞的生長，生長抑制率最高可達40.7％，表現出劑量和時間的依賴性;2）C60(OH)n