富勒醇對(duì)人髓系白血病K562細(xì)胞增殖和凋亡作用的研究.pdf

1、白血病是一類(lèi)造血干細(xì)胞異常的克隆性惡性疾病。大部分臨床化療藥對(duì)正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞缺乏選擇性，在殺傷腫瘤細(xì)胞的過(guò)程中會(huì)損傷人體的正常組織細(xì)胞，引起嚴(yán)重的毒副作用，并產(chǎn)生耐藥性。水溶性多羥基富勒醇C60(OH)n和Gd@C82(OH)n(18≤n≤24)由于其獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理性質(zhì)受到廣泛關(guān)注，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有良好應(yīng)用潛力。迄今為止國(guó)內(nèi)外尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)到富勒醇對(duì)白血病細(xì)胞系作用。本文擬從富勒醇對(duì)血清白蛋白相互作用和富勒醇對(duì)人源慢性髓系白血病

2、K562細(xì)胞增殖和凋亡等方面展開(kāi)研究工作。其具體內(nèi)容如下:
　　第一部分綜述了富勒烯衍生物的性質(zhì)及對(duì)各種腫瘤細(xì)胞的作用，闡明了富勒烯衍生物的潛在抗腫瘤活性和可能作用機(jī)制，以及富勒烯衍生物在光動(dòng)力治療和藥物輸送系統(tǒng)中的獨(dú)特應(yīng)用，進(jìn)一步證明了富勒烯衍生物納米顆粒在腫瘤治療中具有潛在的應(yīng)用前景。同時(shí)指出，目前富勒烯衍生物在臨床或生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域上所面臨的挑戰(zhàn)性問(wèn)題。
　　第二部分利用紫外-可見(jiàn)(UV-vis)光譜與熒光(FL)光譜法，

3、采用Stern-Volmer方程，Lineweavei-Burk雙倒數(shù)方程和雙對(duì)數(shù)回歸曲線(xiàn)模型，研究在不同溫度下內(nèi)嵌金屬富勒醇Gd@C82(OH)n與血清白蛋白間結(jié)合作用的熒光行為，分別計(jì)算結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)和作用距離等，明確了富勒醇對(duì)血清白蛋白的熒光的猝滅作用機(jī)理為動(dòng)態(tài)猝滅和靜態(tài)猝滅協(xié)同作用的結(jié)果。低濃度下富勒醇與血清白蛋白以11結(jié)合形成基態(tài)復(fù)合物，且主要為靜態(tài)猝滅，可能發(fā)生非輻射能量轉(zhuǎn)移，推斷出富勒醇與BSA之間主要為靜電引力，而與

4、HSA的作用力主要為范德華力和氫鍵。從三維熒光光譜與三維等高線(xiàn)剖面圖研究發(fā)現(xiàn)富勒醇與血清白蛋白的反應(yīng)引起蛋白質(zhì)熒光猝滅和構(gòu)象變化。同步熒光光譜表明，富勒醇BSA結(jié)合位點(diǎn)位于酪氨酸(Tyr)殘基，而HSA分子的結(jié)合位點(diǎn)主要在色氨酸(Trp)殘基上，兩者均引起血清白蛋白構(gòu)象的變化。進(jìn)一步建立富勒醇血清白蛋白結(jié)合率的理論模型，預(yù)測(cè)藥物與蛋白結(jié)合率隨著濃度的變化而處于動(dòng)態(tài)變化，且富勒醇與BSA結(jié)合率明顯大于HSA，受溫度影響較大。
　　第

5、三部分觀察富勒醇C60(OH)n對(duì)慢性髓系白血病K562細(xì)胞的生物學(xué)特性的影響，如細(xì)胞增殖、周期以及凋亡等。初步結(jié)果顯示:1）C60(OH)n干預(yù)K562細(xì)胞48h后，抑制增殖效果開(kāi)始顯現(xiàn)，且相對(duì)比較穩(wěn)定，即C60(OH)n的濃度低于60μmol/L時(shí)對(duì)K562細(xì)胞有促進(jìn)增殖的作用，高濃度（80～320μmol/L）時(shí)C60(OH)n明顯抑制K562細(xì)胞的生長(zhǎng)，生長(zhǎng)抑制率最高可達(dá)40.7％，表現(xiàn)出劑量和時(shí)間的依賴(lài)性;2）C60(OH)n