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文檔簡介
1、目的:
1.從反映mtDNA“質(zhì)變”、“量變”的缺失率、拷貝數(shù)著手,探討原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥與mtDNA的相關(guān)性。
2.對骨質(zhì)疏松組與非骨質(zhì)疏松組血清行8-OHdG濃度檢測,探討血清8-OHdG在兩組患者中的變化情況,以進一步證明氧化損傷在骨質(zhì)疏松癥發(fā)生發(fā)展中的作用。
3.進一步探討患者mtDNA缺失和拷貝數(shù)變化與8-OHdG的關(guān)系。
方法:
1.自2011年7月-2012年1月,作者從廣州
2、醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院、廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬骨傷科醫(yī)院住院患者中嚴格按照納入標(biāo)準和排除標(biāo)準隨機選取患者58名,根據(jù)患者的病情需要行骨密度檢測,并參照骨密度檢查結(jié)果,分為骨質(zhì)疏松組(實驗組)40名與非骨質(zhì)疏松組(對照組)18名;其中所有患者均行腰椎(L1-4)骨密度檢測,而同時行左右股骨骨密度檢測的患者45名(實驗組27名,對照組18名);上述58名患者中行腰椎手術(shù)19例,實驗組10例,對照組9例;對上述58名患者、19例手術(shù)患者分別留存外周血
3、、骨組織。
2.對58名患者的外周血、19例手術(shù)患者留存骨組織行普通 PCR定性檢測4.9kb(4977bp)、3.7kb片段缺失,實時熒光定量PCR檢測mtDNA拷貝數(shù)。另外對58名患者的外周血血清Elisa行血清8-OHdG檢測。
3.統(tǒng)計學(xué)分析4.9kb(4977bp)及3.7kb片段缺失、拷貝數(shù)、8-OHdG三個指標(biāo)之間的相關(guān)性及與其他相應(yīng)參數(shù)的相關(guān)性;并對原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的獨立危險因素進行評估。
4、結(jié)果:
1.本研究納入的58名患者,其中實驗組40名,對照組18名,兩組患者在腰椎(L1-4)BMD、T值均有統(tǒng)計學(xué)差異(p<0.01);其中45名患者(實驗組27名,對照組18名)行左右股骨骨密度檢測,兩組患者在左右股骨BMD、T值亦均有統(tǒng)計學(xué)差異(p<0.01);所有患者在年齡、身高、體重、BMI差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p均>0.05),而在性別上兩組患者差異有統(tǒng)計學(xué)差異(p<0.05)。
2.所有患者外周血、19例腰
5、椎手術(shù)患者骨組織中均未發(fā)現(xiàn)mtDNA4.9kb(4977bp)、3.7kb片段缺失。
3.采用2-ΔΔCT的計算法統(tǒng)計所有患者(58名)mtDNA拷貝數(shù)相對對照樣本(選取對照組中一年齡較大且同時行腰椎手術(shù)的患者的血樣本作為對照樣本)的倍數(shù);Spearman相關(guān)分析示19例腰椎手術(shù)外周血及骨組織mtDNA拷貝數(shù)具有很好的相關(guān)性(r=0.710,p=0.001);Spearman相關(guān)分析示58名患者外周血 mtDNA拷貝數(shù)與腰椎(
6、L1-4)BMD、T值呈負性相關(guān)(r=-0.341 p<0.01,r=-0.396 p<0.01);其中同時行左右股骨骨密度檢測的45名患者中,其外周血 mtDNA拷貝數(shù)與左、右股骨 BMD、T值也呈負性相關(guān)(r=-0.543 p<0.01、r=-0.532 p<0.01;r=-0.483 p<0.01、r=-0.449 p<0.01);但本組患者中mtDNA拷貝數(shù)與年齡、BMI無明顯相關(guān)性(p均>0.05)。
4. Spea
7、rman相關(guān)分析示58名患者外周血血清8-OHdG濃度與腰椎(L1-4)BMD、T值呈負性相關(guān)(r=-0.442 p<0.01,r=-0.439 p<0.01);其中同時行左右股骨骨密度檢測的45名患者中,其外周血血清8-OHdG濃度與左、右股骨BMD、T值也呈負性相關(guān)(r=-0.397 p<0.01,r=-0.458 p<0.01;r=-0.423 p<0.01,r=-0.455 p<0.01);本組患者中外周血血清8-OHdG濃度與
8、年齡、BMI無明顯相關(guān)性(p>0.05),與mtDNA拷貝數(shù)亦無明顯相關(guān)性(p>0.05)。
5.多因素 Logistic回歸分析結(jié)果在校正其他影響因素后,本實驗回歸模型中的性別(女性)、8-OHdG、mtDNA拷貝數(shù)為原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的獨立危險因素,其中8-OHdG、mtDNA拷貝數(shù)OR分別為3.410(95%CI:1.011-11.504,P=0.048)、33.721(95%CI:2.926-388.600,p=0.00
9、5)。
結(jié)論:
1.mtDNA4.9kb(4977bp)、3.7kb片段缺失可能與中國人原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥患病關(guān)系不大。
2.患者外周血mtDNA拷貝數(shù)與骨組織mtDNA拷貝數(shù)有顯著相關(guān)性,這在一定程度上說明利用外周血mtDNA拷貝數(shù)來代替骨組織mtDNA拷貝數(shù)進行其變異的檢測的可行性。
3.外周血mtDNA拷貝數(shù)與腰椎(L1-4)及左右股骨BMD、T值明顯相關(guān),這也證明了mtDNA可能參與原發(fā)性骨
10、質(zhì)疏松癥的發(fā)病。
4.外周血血清8-OHdG濃度也與腰椎(L1-4)及左右股骨BMD、T值明顯相關(guān),這說明了氧化損傷機制在原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥發(fā)病中的作用。
5.外周血血清8-OHdG濃度與 mtDNA拷貝數(shù)無明顯相關(guān)性,這在一定程度上說明mtDNA氧化損傷可能不是原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥發(fā)病的主要機制。
6.血清8-OHdG、外周血mtDNA拷貝數(shù)是原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的獨立危險因素,對原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥有一定的預(yù)測價值。
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