膽道閉鎖肝纖維化臨床病理研究.pdf

1、目的：
　　研究膽道閉鎖（Biliary atresia, BA）患兒肝纖維化及肝硬化期肝臟病理改變，分析膽道閉鎖肝纖維化臨床病理特點(diǎn)，提出膽道閉鎖肝纖維化評(píng)分方法并提示預(yù)后，同時(shí)研究轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（Transforming growth factor-β1, TGF-β1）促纖維化通路中TGF-β1、P-Smad3等通路蛋白在膽道閉鎖肝纖維化中的作用。
　　方法：
　　1、收集尸檢患兒肝組織標(biāo)本6例、膽道閉鎖患兒

2、行Kasai術(shù)時(shí)肝活檢組織30例，膽道閉鎖肝硬化患兒行肝移植手術(shù)時(shí)自體肝組織18例，采用HE和免疫組化等技術(shù)分別檢測(cè)門管區(qū)病變范圍、纖維間隔增寬程度、假小葉數(shù)目、炎細(xì)胞浸潤(rùn)程度等，同時(shí)收集膽道閉鎖患兒臨床肝功能等血生化指標(biāo)，探討膽道閉鎖肝纖維化分級(jí)方法，進(jìn)一步分析其與臨床肝功能的關(guān)系。
　　2、收集膽管擴(kuò)張患兒術(shù)中肝組織20例、膽道閉鎖患兒Kasai術(shù)時(shí)肝活檢組織20例，膽道閉鎖肝硬化患兒行自體肝移植手術(shù)時(shí)自體肝組織20例，采用H

3、E和免疫組化等技術(shù)分別檢測(cè)各組患兒肝組織纖維化情況以及肝內(nèi)TGF-β1、Smad2、Smad3、P-Smad2、P-Smad3、Smad4、PAI-1的表達(dá)情況，結(jié)合―BA肝纖維化分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)‖探討各通路蛋白在膽道閉鎖肝纖維化進(jìn)程的作用。
　　結(jié)果：
　　1、⑴.膽道閉鎖肝纖維化進(jìn)程可分為0-6級(jí)，尸檢組歸為0級(jí)，Kasai組患兒肝標(biāo)本大部分在1-3級(jí)，1例出現(xiàn)假小葉歸為4級(jí)，移植組患兒為4-6級(jí)。0級(jí)無(wú)異常纖維組織增生；1級(jí)門

4、管區(qū)纖維組織增寬至3倍大小，界板可見，炎細(xì)胞輕度浸潤(rùn)，P-P區(qū)輕度增生；2級(jí)纖維化繼續(xù)加重，3級(jí)門管區(qū)增寬＞4倍，界板模糊壞死， P-P區(qū)重度增寬；4級(jí)假小葉出現(xiàn)，肝纖維化進(jìn)展至硬化期，門管區(qū)增寬至無(wú)法界定，至6級(jí)時(shí)纖維間隔彌漫，大量瘢痕形成。0-4級(jí)門管區(qū)及P-P區(qū)纖維組織增寬面積具顯著差異（P＜0.05），膽管反應(yīng)逐漸加重；4-6級(jí)以假小葉和間質(zhì)病變?yōu)橹?，假小葉數(shù)量逐漸增多，炎細(xì)胞、纖維細(xì)胞等活性下降，膽管反應(yīng)逐漸消失。⑵. BA患

5、兒0-6級(jí)肝纖維化逐漸加重，肝功能逐漸下降。
　　2、膽擴(kuò)組肝內(nèi)偶見纖維組織增生，Kasai組肝內(nèi)可見纖維組織大量增生、橋接纖維化顯著，移植組可見大量纖維瘢痕組織。Kasai組TGF-β1、Smad3、P-Smad3及PAI-1含量表達(dá)明顯高于其他兩組（p＜0.05），隨著TGF-β1、Smad3、P-Smad3及PAI-1升高肝纖維化逐漸加重；P-Smad3促肝纖維化作用顯著，其含量變化與肝纖維化進(jìn)展密切相關(guān)；移植組TGF-β1