牛白血病間接ELISA抗體檢測(cè)試劑盒的研制及初步應(yīng)用.pdf

1、分類號(hào)華 中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文牛 白血病 間接 E L I S A 抗體檢測(cè)試劑盒 的研制及初步應(yīng)用D ev elo P m en ta n dP re li而 n a ryA P P liea tio no fIn d ire ctE n zy m e · lin k edIm m u n o so rb en tA ssa yTe st 茍 tfo rD eteetin gA n tib o d ya g a in st

2、B o v in eL eu k e而 aVi ru s研 究 生 :指 導(dǎo) 教 師 :指 導(dǎo) 小 組 :吳玉石石德 時(shí) 副教授段宏 安 高級(jí)獸 醫(yī)師畢丁仁 教授石德 時(shí) 副教授段宏 安 高級(jí) 獸 醫(yī)師李 自力 副教授肖運(yùn)才 副教授劉 梅 副教授胡 思順 副教授專業(yè) : 預(yù) 防獸 醫(yī)學(xué)獲得 學(xué)位 名稱 : 農(nóng) 學(xué)碩 士研 究方 向: 獸醫(yī)微 生物 學(xué)與免疫學(xué)獲得 學(xué)位 時(shí) 間: 2008 年 6 月 22 日華 中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院二

3、0 0 八年六 月華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2偽8 屆碩士學(xué)位論文1. 8. 1 藥物治療 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

4、. . . . . . . . . . … …171. 8.2 疫苗防制 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

5、 . . . . . . . . … …171. 8.3 綜合 防制措 施 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

6、. … …171. 9 牛 白血病 的公共衛(wèi)生學(xué)意義 . . . . . . . . …… ， . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …181.ro 研 究的 目的和意義 . . . . . . . . . . . . . . . .

7、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … ， . . . . … …192 試驗(yàn)材料 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

8、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …202.1 主要試 劑 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

9、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……202.2 主要溶液 的配制 . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

10、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …202.2.1 表達(dá)菌 復(fù)蘇相 關(guān)溶液 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

11、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …202.2.2SD S一 PA G E 電泳相 關(guān)溶液 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

12、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …202.2. 3 蛋 白純化相關(guān)溶液 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

13、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …212.2.4E U SA 相關(guān)溶液 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… : . . . . . . . . . . . . .

14、. . . . . . . … …222. 3 標(biāo)準(zhǔn)血清 、樣 品血清和對(duì) 比試 劑盒 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……222.4 主要儀器 與設(shè)備 . . . . . . . . . . . . . . . . .

15、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……， . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …223 試驗(yàn) 方法 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

16、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …233.1GP5 1 重組 蛋 白的制 備及純化 . . . . . . . . . . . . .

17、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …233.1.1 表達(dá)菌 的復(fù)蘇及誘 導(dǎo)表達(dá) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

18、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …233.1. 2 重 組 蛋 白的提 取 . . …， . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

19、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……243.1. 3 重 組 蛋 白的純 化 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

20、 . . . . . . . . . . . . . ……243.1. 4 重組蛋 白的復(fù)性 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

21、 . … …243.1. 5 純化 蛋 白的 PA G E 電泳鑒 定和濃度 的測(cè) 定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …253. 2E U SA 試 劑盒組裝 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

22、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …253. 2.1 外包裝及標(biāo)簽 的制備 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

23、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……， . . . . . . . . . . . . … …253. 2.2 試 劑盒 內(nèi)組分 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

24、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……253. 2.3 試 劑盒 內(nèi)試 劑 的配制 及質(zhì)量控制 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……253. 2.4 試

25、 劑盒 內(nèi)抗 原包被 板 的制備 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……263. 2.5 試 劑盒 的操 作 說 明書 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

26、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……273. 3 試 劑盒 的評(píng) 價(jià) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

27、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……293. 3.1 試 劑盒保 存 期試驗(yàn) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

28、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……293. 3. 2 試 劑盒特 異性試驗(yàn) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

29、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …293. 3. 3 試 劑 盒 靈敏度 試驗(yàn) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

30、. . . . . . . . . . . . . . . . ……293. 3. 4 試 劑盒重 復(fù)性試驗(yàn) . . . . . . . . . . . . . . …… ， . ， . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……293.

31、 3. 5 試 劑 盒 結(jié)果判 定標(biāo)準(zhǔn) 的確 定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …303. 3. 6 對(duì) 比診 斷 試 驗(yàn) . . . . . . . . . . . . . . . . . .

32、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……303. 3. 7 與 國外 同類 試 劑 盒 的對(duì) 比試 驗(yàn) . . . . . . . . . . . . . . . . . . .