豬圓環(huán)病毒2型抗體間接ELISA檢測試劑盒的研制和應(yīng)用.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩56頁未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、利用已構(gòu)建的基因工程重組菌BL21(DE3)表達(dá)豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)ORF2編碼的結(jié)構(gòu)蛋白,并成功摸索出一種快速純化該蛋白的方法.用純化的蛋白作為包被抗原,建立了檢測豬血清中PCV2抗體的間接ELISA方法;以該方法為基礎(chǔ)初步組裝出試劑盒,并進(jìn)行了初步應(yīng)用.對ELISA的反應(yīng)條件進(jìn)行了探索,確定了最適工作條件.結(jié)果表明,重組蛋白抗原的最適包被濃度為0.1μg/mL,最適包被條件為37℃2h加4℃過夜;待檢血清的稀釋度為1:40;H

2、RP-兔抗豬IgG的工作濃度為1:800;待檢血清和酶標(biāo)二抗的反應(yīng)條件和反應(yīng)時(shí)間均為37℃30min;底物室溫顯色10~15min;陰陽性臨界值為0.4.經(jīng)阻斷試驗(yàn)、交叉反應(yīng)試驗(yàn)和重復(fù)性試驗(yàn),表明建立的間接ELISA方法是特異的,且重復(fù)性很好;與間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)進(jìn)行比較,其敏感性和特異性分別是94.3﹪和90﹪,說明兩種檢測方法間無顯著性差異;進(jìn)行了試劑盒的組裝及其保存期試驗(yàn),結(jié)果表明試劑盒在4℃下至少可保存三個(gè)月.用試劑盒檢

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論