蓽拔酰胺構(gòu)效關系及作用機制研究與Keap1-Nrf2小分子抑制劑優(yōu)化設計.pdf

1、一、蓽拔酰胺衍生物的設計、合成及抗腫瘤作用機制研究
　　蓽拔酰胺是提取自天然植物體蓽拔中的生物堿，具有多種藥理活性。其最大特點是對多種腫瘤細胞具有良好的細胞毒性，而對正常細胞則無影響，并且可以提高某些化學治療藥的抗腫瘤療效。
　　近年來，化學生物學方法在尋找新化合物的作用靶標中應用越來越廣泛?；钚詫虻男》肿犹结?Activity-based probes，ABPs)技術(shù)則是近些年發(fā)展起來的研究蛋白質(zhì)功能的新技術(shù)，多功能小分

2、子探針能在復雜的生物樣品中特異性地標記處于作用狀態(tài)下的靶標蛋白，使得對這些活性蛋白的分離、鑒定、分布、功能等研究成為可能。
　　本論文第一部分根據(jù)本課題組擴環(huán)得到的活性優(yōu)良蓽拔酰胺衍生物PL-51，設計合成了一類七元內(nèi)酰胺環(huán)蓽拔酰胺衍生物30個，體外抗腫瘤活性測試顯示大部分衍生物都基本保持了與PL-51和蓽拔酰胺相當?shù)幕钚?，特別是化合物P15和P18對六種腫瘤細胞株都表現(xiàn)出了優(yōu)于蓽拔酰胺的活性，IC50值達到納摩爾級別，構(gòu)效關系研

3、究表明苯環(huán)上單取代的化合物活性優(yōu)于雙取代和三取代化合物，小基團取代優(yōu)于大基團取代。
　　本課題組前期得到一個體外抗腫瘤活性優(yōu)良的蓽拔酰胺衍生物PL-23，進行作用機制驗證發(fā)現(xiàn)，它并不像蓽拔酰胺通過提高腫瘤細胞內(nèi)活性氧水平發(fā)揮作用，常見的相關激酶也不是其作用靶標。因此利用小分子探針技術(shù)對蓽拔酰胺衍生物PL-23進行作用靶標的尋找，設計合成了活性探針ZM76和兩個非活性探針ZM77、ZM78，明確了蛋白分子量為40 kDa處為靶蛋白條

4、帶，通過初步的質(zhì)譜分析，得到了兩個得分最高的潛在靶標蛋白Annexin A1和Annexin A2。
　　二、Keap1-Nrf2小分子抑制劑優(yōu)化設計
　　Keap1-Nrf2-ARE信號通路在抗腫瘤、抗炎等氧化應激相關疾病發(fā)揮重要作用，Nrf2是細胞內(nèi)重要的轉(zhuǎn)錄激動劑，受Keap1的負反饋調(diào)控，氧化應激環(huán)境下，Nrf2解離入核，與抗氧化應答因子ARE結(jié)合，誘導一系列保護蛋白表達，而高活性的Keap1-Nrf2蛋白相互作用小