清開靈片的質(zhì)量控制方法研究.pdf

1、清開靈片為臨床常用的口服中藥制劑之一，收載于《中國藥典》2015年版一部，由水牛角、梔子、板藍(lán)根、金銀花和珍珠母五味藥材和膽酸、豬去氧膽酸、黃芩苷三種化合物組成，具有清熱解毒的功效，用于治療外感風(fēng)熱所致的發(fā)熱，咽喉腫痛，上呼吸道感染和各類感冒病癥等。清開靈片現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中對藥效組分的質(zhì)量控制包括了綠原酸的鑒別，膽酸、豬去氧膽酸、黃芩苷和梔子苷的鑒別與含量測定以及總氮量測定。該方法一方面缺少對水牛角的質(zhì)量控制，另一方面總氮量的檢測方法過于寬泛

2、，專屬性差，不足以評價方中以氨基酸為藥效組分的多味藥材的質(zhì)量。其次，兩個單組分的含量測定方法過于繁冗，有待改進(jìn)。通過對清開靈片的處方進(jìn)行分析，從定性與定量兩個方面分別對其質(zhì)量控制的方法進(jìn)行進(jìn)一步研究，使全方各味藥材都能得到有效控制。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴建立了基于TaqMan探針的實時熒光聚合酶鏈反應(yīng)的水牛角鑒別方法。實驗選用水牛特異性引物擴(kuò)增目的基因，通過檢測熒光信號來判定是否擴(kuò)增成功，以確定樣品中是否含有水牛角。DNA最

3、低檢測濃度為0.2ng/mL，片劑含水牛角對照品質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)0.2％即可呈陽性。⑵建立了異硫氰酸苯酯柱前衍生-高效液相色譜法測定清開靈片中氨基酸組分的含量。利用梯度洗脫使18種氨基酸能完全分離，天冬氨酸、谷氨酸在0.01～0.2mg/mL范圍內(nèi)線性良好，其余氨基酸在0.01～0.5mg/mL范圍內(nèi)線性良好，平均回收率在95.2%～106.6%之間（RSD<3.0%），方法精密度好，準(zhǔn)確度高。⑶整合優(yōu)化了梔子苷和黃芩苷的高效液相色譜方法，并