電針足少陽經(jīng)穴對NFATc1阻滯劑干預(yù)后雄性大鼠骨重塑平衡的調(diào)節(jié).pdf

1、目的：此次實驗以FK506（信號阻滯劑）大鼠為研究對象，行足少陽經(jīng)穴電針干預(yù)后進(jìn)一步觀察其骨組織切片，并檢測骨重塑相關(guān)轉(zhuǎn)錄基因的表達(dá)，以探索電針對大鼠骨重塑過程相關(guān)信號分子、轉(zhuǎn)導(dǎo)信號通路及上、下游關(guān)系的影響。
　　方法：由西南醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供的雄性SD大鼠，共計40只，鼠齡大小為：10個月，重量為：310±10g，全部用阿拉伯?dāng)?shù)字編號后查用Excel軟件生成的隨機(jī)數(shù)字表，分為：空白組10只和模型組30只，空白組不做任何處置

2、，針對模型組，再進(jìn)行隨機(jī)分配，分為三組，(1)模型對照組(FK506組)、(2)模型加預(yù)先電針組（預(yù)電針+FK506組）、(3)模型加電針組（電針+FK506組），進(jìn)行為期7天皮下注射FK506溶液（注射劑量：0.3ml/kg，F(xiàn)K506濃度：1mg/ml）。針對第(2)組，在進(jìn)行注射溶液之前，需要使用電針對足少陽經(jīng)穴進(jìn)行7天的干預(yù)。經(jīng)FK506造模結(jié)束3天后，電針+FK506組及預(yù)電針+FK506組開始電針足少陽經(jīng)穴（環(huán)跳、陽陵泉、懸

3、鐘）的干預(yù)，電針選疏密波，20Hz，1次/d，15分鐘/次，每個療程連續(xù)5次針刺干預(yù)后中斷2日，持續(xù)6個療程。處死后光鏡下觀察骨組織切片HE染色及骨小梁面積比，并使用RT-PCR技術(shù)，對涉及骨重塑的關(guān)鍵基因，如OPG、RANKL、NFATc1及CBFa1mRNA表達(dá)的變化進(jìn)行檢測。
　　結(jié)果：(1)空白組：骨小梁排列比較密集，主要呈塊狀和片狀，具有很好的連接性，呈網(wǎng)狀分布，髓腔組織結(jié)構(gòu)沒有明確的變化;FK506組：與空白組相比，骨

4、小梁排列明顯錯亂，而且數(shù)量顯著減少，連續(xù)性低，距離明顯增大，寬度更細(xì)、更窄，而且髓腔有明顯變大;FK506+電針組，和FK506組比起來，骨小梁的排列較為均勻，數(shù)量增加，寬度更粗，間距減小，而且連續(xù)性也稍微變好，而且髓腔有明顯的變小;FK506+預(yù)電針組：和FK506組比起來，骨小梁的排列均勻，連續(xù)性增強，數(shù)量增多，寬度變粗，間距減小，髓腔明顯變小。
　　(2)骨小梁面積比：四組之間有很大的差異，具有高度的統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.00

5、6)，但是FK506+預(yù)電針組和FK506+電針組雖然較空白組都有明顯的改善，但是兩者之間沒有統(tǒng)計學(xué)的差異(P＞0.05)。
　　(3)骨CBFa1mRNA表達(dá)：FK506組的數(shù)值比空白組升高，預(yù)先電針+FK506組及FK506+電針組兩組，會出現(xiàn)降低現(xiàn)象，但是兩者之間的差異，都沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(4)骨RANKLmRNA表達(dá)：FK506組比空白組明顯增高，預(yù)先電針+FK506組及FK506+電針組要明顯

6、降低，均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);但是預(yù)電針+FK506組和FK506+電針組之間，沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(5)骨OPGmRNA表達(dá)：無論是FK506組同空白組相比，還是同兩個治療組進(jìn)行比較，還是預(yù)電針+FK506組和FK506+電針組之間進(jìn)行比較，都沒有明顯的差異，沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　(6)骨NFATc1mRNA表達(dá)：雖然FK506組比空白組要略高，但是沒有統(tǒng)計學(xué)意義;無論是模型三組之

7、間進(jìn)行比較，還是預(yù)電針+FK506組和FK506+電針組兩組之間進(jìn)行比較，均沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論：電針足少陽經(jīng)穴能和調(diào)骨重塑偶聯(lián)，繼而平衡成骨和破骨活動，其機(jī)制可能是通過兩個主控轉(zhuǎn)錄因子RANKL和NFATc1，調(diào)整全身骨代謝，產(chǎn)生和調(diào)骨重塑過程、再建正常偶聯(lián)的凈效應(yīng)。皮下注射高濃度FK506溶液，NFATc1mRNA表達(dá)受阻滯，則CBFa1mRNA過表達(dá)，導(dǎo)致RANKLmRNA高表達(dá)，可以成功誘導(dǎo)骨重塑失偶