水稻白葉枯病菌效應(yīng)蛋白XopN病理功能與核黃素對(duì)擬南芥開(kāi)花調(diào)控的影響.pdf

1、黃單胞菌外蛋白(Xanthomonas ourer proteins，Xop)是水稻黃單胞菌水稻致病變種Xoo(Xanthomonas oryzae pv.oryzae，Xoo)通過(guò)三型分泌系統(tǒng)分泌到細(xì)胞外的一類蛋白質(zhì)，Xop蛋白在大部分黃單胞菌中高度保守。XopN是一個(gè)Xop蛋白，是Xoo的一個(gè)效應(yīng)因子，通過(guò)三型分泌系統(tǒng)泌出，但其在菲律賓菌株P(guān)XO99A中功能未知。本研究利用同源雙交換法敲除菌株P(guān)XO99A中的XopN基因并對(duì)其進(jìn)行基

2、因回補(bǔ)，獲得PXO99A△XopN缺失菌株和C-XopN回補(bǔ)菌株。測(cè)定XopN缺失菌株的生長(zhǎng)速度、對(duì)寄主水稻的致病力及在非寄主植物煙草上的過(guò)敏反應(yīng)來(lái)進(jìn)行XopN的病理功能研究。結(jié)果表明:在NA培養(yǎng)液中，XopN缺失菌株生長(zhǎng)速度顯著性小于野生型PXO99A的生長(zhǎng)速度;XopN缺失菌株在IRBB13等水稻品種中引起的病斑長(zhǎng)度短于野生型PXO99A引起的病斑長(zhǎng)度，差異顯著，且這種差異依賴于不同的水稻品種;其侵染葉片的含菌量少于野生型PXO99

3、A侵染葉片的含菌量，差異顯著;XopN回補(bǔ)能夠恢復(fù)菌株P(guān)XO99A對(duì)水稻的致病力和自身生長(zhǎng)速度;XopN缺失菌株會(huì)延遲PXO99A在煙草上的過(guò)敏反應(yīng)，微敏反應(yīng)與過(guò)敏反應(yīng)結(jié)果一致。
　　核黃素結(jié)合蛋白是一種能與核黃素結(jié)合的蛋白。最近，本實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)，在擬南芥轉(zhuǎn)基因植株中，異源表達(dá)核黃素結(jié)合蛋白R(shí)fBP(riboflavin-binding protein)會(huì)導(dǎo)致擬南芥葉片細(xì)胞內(nèi)H2O2含量增高。促進(jìn)FD和AP1基因的上調(diào)表達(dá)(FD

4、是莖間開(kāi)花調(diào)控基因，AP1是位于花芽頂端的花分生組織特征基因)，從而誘導(dǎo)擬南芥提前開(kāi)花。本文進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)沉默轉(zhuǎn)RfBP擬南芥中的RfBP基因后，早花表型消失，擬南芥細(xì)胞內(nèi)核黃素水平升高，F(xiàn)D和AP1基因的表達(dá)量降低，H2O2積聚量下降到轉(zhuǎn)RfBP擬南芥植株的55％。外源核黃素處理轉(zhuǎn)RfBP擬南芥植株葉片，也可使早花表型消失，擬南芥細(xì)胞內(nèi)核黃素水平升高，H2O2濃度降低，F(xiàn)D和AP1表達(dá)量降低。用H2O2處理野生型擬南芥也會(huì)使擬南芥