鹿角盤膠原蛋白的制備及其水解產(chǎn)物的成分分析.pdf

1、膠原蛋白是膠原的水解產(chǎn)物，具有穩(wěn)定的三螺旋結(jié)構(gòu)和相對(duì)較小的分子質(zhì)量，降解速度較快、易于被人體吸收。近年來的相關(guān)研究證實(shí)，膠原蛋白具有多種生物學(xué)活性及藥理學(xué)作用，被廣泛應(yīng)用于食品、化妝品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
　　本文研究了鹿角盤的基本組成成分，采用胃蛋白酶提取法提取鹿角盤中的膠原蛋白并用真空冷凍干燥成鹿角盤膠原蛋白粉;另外采用生物酶解技術(shù)，將鹿角盤膠原蛋白粉酶解成肽。本課題不僅可以使大家更好的認(rèn)識(shí)鹿角盤，而且能夠更好的發(fā)揮其作用，使其更好

2、的被充分利用。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1.本實(shí)驗(yàn)采用國標(biāo)對(duì)鹿角盤進(jìn)行了基本成分分析。結(jié)果如下:鹿角盤灰分58.14％，脂肪2.57％，總糖1.74％，蛋白質(zhì)33.27％。
　　2.采用胃蛋白酶提取法提取鹿角盤中的膠原蛋白，并通過真空冷凍干燥得到鹿角盤膠原蛋白粉，確定胃蛋白酶最佳濃度為2％。
　　3.采用市面常見的三種酶進(jìn)行鹿角盤膠原蛋白水解對(duì)比實(shí)驗(yàn)，由結(jié)果可知，采用堿性蛋白酶對(duì)鹿角盤膠原蛋白水解有更高的水解率。采

3、用響應(yīng)面法優(yōu)化堿性蛋白酶水解鹿角盤膠原蛋白制備鹿角盤肽的工藝條件。采用最佳水解條件對(duì)響應(yīng)面法得到的結(jié)論進(jìn)行驗(yàn)證，實(shí)驗(yàn)證明此方法的合理性，并且得到了鹿角盤肽的最佳制備工藝參數(shù)為:時(shí)間5.5h，pH9.5，酶量1272u/g，溫度53℃，膠原蛋白水解率為22.13％。
　　4.本實(shí)驗(yàn)利用膜過濾和凝膠層析對(duì)水解的膠原多肽進(jìn)行純化，并采用紫外掃描得到鹿角盤膠原多肽在220 nm處有最大吸收峰。可以說明水解液的主要成分為多肽類，經(jīng)過Seph

4、adexG-25、SephadexG-15凝膠層析純化后的鹿角盤多肽具有明顯的多肽類特征，對(duì)檢測(cè)波長λ=210nm，時(shí)間為13.210min得到的單體化合物進(jìn)一步純化，對(duì)鹿角盤純化多肽進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得其分子量為1342.9m/z，又用飛行質(zhì)譜儀對(duì)之進(jìn)行了驗(yàn)證，測(cè)定結(jié)果分別為1226.7，1069.8和1010.8m/z及后續(xù)多肽片段，得知此多肽片段對(duì)應(yīng)一段氨基酸片段為甘氨酸和脯氨酸(Gly，Pro)，經(jīng)過分析，此多肽片段符合膠原蛋白多肽的