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1、色譜固定相是色譜分離的核心。固定相基質(zhì)表面上不同的改性方式可以產(chǎn)生不同的選擇性分離效果。萬(wàn)古霉素作為大環(huán)抗生素的一種,具有復(fù)雜、獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu),以其作為表面改性劑,可以與樣品分子產(chǎn)生多種分子間相互作用。本文根據(jù)萬(wàn)古霉素獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu)特征,通過(guò)單體衍生法制備出萬(wàn)古霉素手性毛細(xì)管整體柱;間接鍵合法制備出萬(wàn)古霉素手性液相色譜鍵合固定相,并將其應(yīng)用于反相、親水以及離子交換等色譜分離模式。
整體柱具有制備簡(jiǎn)單、柱容量高、固定相的表面
2、易于改性等特征。因此,通過(guò)單體衍生法在聚丙烯酰胺整體基質(zhì)上鍵合萬(wàn)古霉素分子,得到萬(wàn)古霉素手性毛細(xì)管整體柱。優(yōu)化后柱制備條件為:以甲酰胺為溶劑,在堿性環(huán)境中,萬(wàn)古霉素與GMA的摩爾比例為1∶5,反應(yīng)溫度為50℃以及聚合反應(yīng)時(shí)間為6h。在微柱液相色譜恒壓模式下將制備的色譜柱用于氨基酸對(duì)映體分離,當(dāng)緩沖液離子強(qiáng)度為10 mmol/L、pH=4.5、柱壓P=5.0 Mpa時(shí),苯丙氨酸的兩種對(duì)映異構(gòu)體分離度R為1.49;酪氨酸和色氨酸在緩沖液離子
3、強(qiáng)度為10 mmol/L、pH=4.5、柱壓P=4.7 Mpa時(shí),其分離度R分別為2.99、1.95。
以粒徑為10μm的氨基硅膠顆粒為載體,戊二醛為間隔臂,制備了萬(wàn)古霉素手性液相色譜鍵合固定相。制備的色譜柱具有良好的穩(wěn)定性,重復(fù)進(jìn)樣300次,仍能保持良好的分離能力。將其應(yīng)用于反相、親水以及陰離子交換等多種液相色譜分離模式,證實(shí)其不僅可以應(yīng)用于正相、反相模式下手性化合物的分離,同時(shí)也可應(yīng)用于像親水、陰離子交換模式下非手性物
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