一種基于聚集誘導(dǎo)發(fā)光原理的脂多糖的熒光檢測(cè)方法.pdf

1、背景及目的：2001年，唐本忠研究組發(fā)現(xiàn)了聚集誘導(dǎo)發(fā)光（aggregation-induced emission，AIE）現(xiàn)象，后續(xù)研究證明，具有AIE特性的分子材料作為熒光探針在生物檢測(cè)技術(shù)中擁有較大的潛在實(shí)用性，且和傳統(tǒng)生物檢測(cè)材料相比具有顯著優(yōu)勢(shì)。因此，AIE分子材料在生物檢測(cè)領(lǐng)域中引起重視，越來(lái)越多的AIE分子正逐漸被發(fā)現(xiàn)或合成，相關(guān)的研究工作也于近年取得諸多進(jìn)展。本實(shí)驗(yàn)旨在探索熒光探針TPEBe-I對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素（又叫脂多糖，l

2、ipopolysaccharides，LPS）的檢測(cè)作用。
　　方法：將熒光探針TPEBe-I溶于DMSO并調(diào)配至一定濃度，取TPEBe-I溶液與數(shù)種待檢測(cè)液體（HEPES、5％葡糖糖液、10％葡糖糖液、生理鹽水、Ringer'液）按比例均勻混合，利用熒光分光光度儀檢測(cè)混合液體的熒光強(qiáng)度（激發(fā)光波長(zhǎng)為420nm，波長(zhǎng)為500~700nm范圍的熒光檢測(cè)），分析HEPES液中熒光強(qiáng)度與LPS濃度之間的關(guān)系，再在波長(zhǎng)為365nm的紫外燈

3、照射下觀察混合液體發(fā)光情況，并拍照記錄。用TPEBe-I分別檢測(cè)含Glycol-CS和LPS的HEPES液體，對(duì)比二者的熒光強(qiáng)度。檢測(cè)TPEBe-I與TPEBe-I/LPS混合物的紫外吸收光譜，計(jì)算TPEBe-I探針的Stokes位移。采用動(dòng)態(tài)光散射檢測(cè)HEPES液中TPEBe-I和TPEBe-I/LPS聚合物的直徑。
　　結(jié)果：熒光探針TPEBe-I加入含LPS的待檢液體后可產(chǎn)生AIE效應(yīng)，熒光分光光度儀檢測(cè)到液體的熒光強(qiáng)度明顯

4、增強(qiáng)，并且在一定范圍內(nèi)，熒光強(qiáng)度變化趨勢(shì)與LPS濃度變化趨勢(shì)相一致，紫外燈照射下，見液體可發(fā)出較強(qiáng)的橘紅色光。不含LPS的HEPES液、5％葡糖糖液和10％葡糖糖液熒光強(qiáng)度經(jīng)檢測(cè)未見明顯增強(qiáng)，紫外燈照射下，也未見明顯發(fā)光；而不含LPS的生理鹽水和Ringer'液熒光強(qiáng)度有較為明顯的增強(qiáng)。TPEBe-Ⅰ探針對(duì)與LPS有著相同化學(xué)結(jié)構(gòu)的Glycol-CS檢測(cè)中，熒光強(qiáng)度無(wú)明顯增強(qiáng)。TPEBe-I探針的Stokes位移為165nm。HEPES