茶樹(shù)品種及兒茶素氧化與其防癌效應(yīng)的比較和機(jī)制研究.pdf

1、茶樹(shù)起源于我國(guó)，日常飲用的茶由茶樹(shù)鮮葉經(jīng)不同加工方法制作而成。雖然茶與健康領(lǐng)域的研究已成為熱點(diǎn)，但對(duì)于茶樹(shù)品種間生物效應(yīng)的比較以及其生物化學(xué)基礎(chǔ)的研究尚未有開(kāi)展。本研究在全國(guó)范圍內(nèi)選擇14種典型茶樹(shù)品種，分別在乳腺癌細(xì)胞、肥胖動(dòng)物和化學(xué)誘導(dǎo)的乳腺癌動(dòng)物多種模型上考察不同茶樹(shù)品種的癌癥預(yù)防效應(yīng)，并從化學(xué)成分和生物靶點(diǎn)的角度闡述機(jī)制。我們發(fā)現(xiàn)不同茶樹(shù)品種體外抑制乳腺癌細(xì)胞增殖效應(yīng)差異顯著，并且與各品種酯型兒茶素含量成正相關(guān)，其機(jī)制涉及哺乳動(dòng)

2、物雷帕霉素靶點(diǎn)（mammalian target of rapamycin，mTOR）信號(hào)通路被不同程度的抑制。另外，不同茶樹(shù)品種減肥效應(yīng)與其體外抑癌活性正相關(guān)，對(duì)調(diào)節(jié)體重和血漿中脂肪代謝指標(biāo)亦體現(xiàn)顯著差異。再者，添加5％(w/w)云抗10號(hào)茶粉的飼料干預(yù)可顯著降低1-甲基-1-亞硝基脲(1-methyl-1-nitrosourea，MNU)誘導(dǎo)的大鼠乳腺癌發(fā)生率和平均荷瘤數(shù)量，機(jī)制涉及腫瘤組織中AMP依賴(lài)的蛋白激酶(AMP-activ

3、ated protein kinase，AMPK)的激活和mTOR的抑制。
　　茶葉的不同加工方法會(huì)造成兒茶素不同程度的氧化。綠茶經(jīng)過(guò)非發(fā)酵方法加工，被認(rèn)為是最大程度地保留了包括兒茶素在內(nèi)的絕大多數(shù)天然化學(xué)成分。而紅茶加工經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理，其中的兒茶素大量氧化，多以聚合物形式存在。本研究使用相同的茶鮮葉為原料加工成綠茶和紅茶，專(zhuān)一地考察綠茶和紅茶的加工方式對(duì)其體外抑制癌細(xì)胞增殖效應(yīng)的影響，有效避免了其他多種因素的干擾。并引入化學(xué)氧化形

4、成的氧化型表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate，EGCG)與天然EGCG進(jìn)行比較，圍繞茶葉加工的化學(xué)本質(zhì)---兒茶素氧化探討其體外抑癌機(jī)制。結(jié)果表明，綠茶和單體EGCG抑制口腔癌Tca8113細(xì)胞增殖效應(yīng)分別顯著強(qiáng)于紅茶和EGCG氧化產(chǎn)物;綠茶和單體EGCG在培養(yǎng)基中產(chǎn)生過(guò)氧化氫(H2O2)能力分別顯著強(qiáng)于紅茶和EGCG氧化產(chǎn)物;綠茶和單體EGCG體外抑制硫氧還蛋白還原酶(thioredoxin

5、 reductase，TrxR)的能力分別顯著強(qiáng)于紅茶和EGCG氧化產(chǎn)物。
　　TrxR是癌癥治療的體內(nèi)分子靶點(diǎn)，臨床化療藥順鉑和兒茶素EGCG的抑癌機(jī)制均涉及對(duì)癌細(xì)胞中的TrxR的抑制。為深入研究TrxR與癌癥的機(jī)制聯(lián)系，我們使用另一種鉑類(lèi)藥物奈達(dá)鉑(Nedaplatin，NDP)考察其在體內(nèi)模型中與TrxR相互作用機(jī)制。本研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠肝癌腹水細(xì)胞H22中，NDP劑量依賴(lài)地抑制細(xì)胞中的TrxR活力。對(duì)TrxR活力的抑制與對(duì)腹

6、水體積的抑制高度相關(guān)(r=0.978，p＜0.01)，此結(jié)果亦為EGCG抑癌研究提供了重要基礎(chǔ)。作為一種適應(yīng)性反應(yīng)，奈達(dá)鉑處理后存活的腹水癌細(xì)胞表型發(fā)生變化，細(xì)胞體積增大，且胞內(nèi)抗氧化酶和主要非蛋白自由巰基含量增加2-5倍。給予2-氨基-4-（s-丁基磺酰亞氨）丁酸(buthionine sulfoximine，BSO)共處理，可有效地消除所產(chǎn)生的適應(yīng)性反應(yīng)，徹底殺傷癌細(xì)胞。綜上，NDP的藥理作用涉及對(duì)癌細(xì)胞內(nèi)的TrxR活力的抑制，BS