伏馬菌素吸附菌株的篩選及機理初探.pdf

1、伏馬菌素(Fumonisins，F(xiàn)Bs)是一組主要由多育鐮刀菌、串珠鐮刀菌等產生的水溶性的真菌毒素。迄今為止，28種伏馬菌素已經(jīng)被分離鑒定，其中伏馬菌素B1(FB1)和伏馬菌素B2(FB2)在自然界中存在廣泛，毒性最強。作為世界主要農作物，玉米是谷物食品和飼料的主要來源之一，因而存在于玉米及其相關食品中的伏馬菌素污染已引起世界各國廣泛關注，如何去除玉米及其相關制品中伏馬菌素的技術和方法也日益受到人們的重視。然而，采用生物方法去除伏馬菌素

2、的報道尚不多見。本論文采用乳桿菌菌株與伏馬菌素的共培養(yǎng)技術，通過ELISA和HPLC相結合方式檢測菌體細胞吸附FB1和FB2的效果，評價了48株菌對FB1和FB2脫除能力，從中篩選出具有較高FB1和FB2吸附率的植物乳桿菌（Lactobacillusplantarum）ZJ8和戊糖乳桿菌（Lactobacilluspentosus）X5。并在此基礎上，探討了不同物理因素和不同處理條件下乳桿菌吸附FB1和FB2的特性，分析了伏馬菌素對乳桿

3、菌生長的影響，探索了乳桿菌吸附FB1和FB2的機制,旨在為利用乳桿菌生物脫除伏馬菌素方面的研究與應用提供參考與理論依據(jù)。主要結果如下:
　　1、乳桿菌ZJ8和X5有很強的結合伏馬菌素的能力，2株菌對FB1的吸附率分別為89.9％和86.0％，對FB2吸附率分別為95.0％和93.1％。乳桿菌吸附FB2的效果普遍高于吸附FB1的效果。菌株ZJ8和X5在吸附FB1和FB1方面無交互作用，無競爭性抑制，表明吸附FB1和FB1的結合位點不

4、同。
　　2、培養(yǎng)時間、pH和溫度影響菌株吸附伏馬菌素的效果。乳桿菌菌株ZJ8和X5結合FB1和FB2的效果隨培養(yǎng)時間延長而增加。當pH為4時，2株菌對FB1和FB2的吸附率均達最大，堿性條件不利于菌株吸附伏馬菌素。高溫降低了菌株吸附伏馬菌素的效果。進一步的，5～10μg/mL的附伏馬菌不會顯著影響2株乳桿菌的生長，同時菌體細胞在吸附FB1和FB2后其活性也不會受到影響。
　　3、菌株對伏馬菌素的吸附與菌體活力無關。強酸和T

5、CA處理后菌株對FB1和FB2的吸附率顯著提升，而SDS處理后菌株對FB2的吸附率吸附率顯著提升，對FB1的吸附能力影響不大。溶菌酶處理后2株菌吸附FB1的能力顯著下降，而吸附FB2的能力顯著提升。胰蛋白酶處理后菌株表現(xiàn)差異性，處理后2株菌吸附FB1的能力都顯著下降，但菌株ZJ8吸附FB2的能力無顯著性變化，對菌株X5吸附吸附FB2的能力顯著提升。
　　4、細胞壁是菌株結合伏馬菌素的主要部位。2株菌的細胞壁對FB1的吸附率分別達到

6、96.8％和96％，對FB2的吸附率均達到100％。去除菌體細胞壁后，其原生質體對FB1的吸附率不到13％，對FB2的吸附率不到19％。而無細胞提取物對FB1和FB2的吸附率均不足5％。進一步地，2株乳桿菌胞壁成分中肽聚糖對FB1的吸附率分別為98.4％和97.8％，對FB2的吸附率達100％，表明菌體細胞壁上的肽聚糖是吸附伏馬菌素B1和B2的最主要成分。
　　綜上，篩選到的2株乳桿菌具有很強的結合伏馬菌素的能力，或許可以用作一種