水、沉積物和水產(chǎn)品中獸藥多殘留同時分析方法及其應(yīng)用研究.pdf

1、隨著畜禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，我國獸藥的種類和用量日益增加。生產(chǎn)使用過程中的獸藥可通過多種途徑進(jìn)入水環(huán)境，威脅環(huán)境安全和生態(tài)健康。本論文在國內(nèi)主要養(yǎng)殖區(qū)域獸藥使用情況、福建省醫(yī)療機(jī)構(gòu)主要用藥和九龍江流域獸藥多殘留研究調(diào)查的基礎(chǔ)上，選擇敏感且具有代表性的17類79種獸藥，建立其在水、沉積物和水產(chǎn)品中靈敏、準(zhǔn)確、快速的同時分析方法，并應(yīng)用于九龍江上游北溪西溪、河口及廈門近岸海域表層水、九龍江河口沉積物和廈門常見水產(chǎn)品中獸藥多殘留狀況的研究

2、。
　　 主要內(nèi)容和研究結(jié)果如下:
　　 (1)79種獸藥液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分組檢測方法的建立
　　 運(yùn)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，在多反應(yīng)選擇監(jiān)測(MultipleReactionMonitoring，MRM)模式下，通過優(yōu)化質(zhì)譜參數(shù)如母離子、子離子、源內(nèi)碎裂電壓、碰撞能等以及液相色譜分離條件如流動相組成、梯度洗脫程序及目標(biāo)物的試樣溶劑等，建立了靈敏度高、定性準(zhǔn)確、快速有效檢測79種獸藥的分析方法。大部分獸藥的儀器

3、測定限在1.0μg/L以下;在0.1～500μg/L濃度范圍內(nèi)具良好線性。79種目標(biāo)獸藥分3組進(jìn)行檢測，整個儀器分析過程可在75min內(nèi)完成，各目標(biāo)物的分離度、靈敏度和重現(xiàn)性良好。為后續(xù)的環(huán)境水樣、沉積物和水產(chǎn)品中獸藥殘留的相關(guān)研究提供了檢測手段。
　　 (2)水中獸藥多殘留分析方法及其應(yīng)用
　　 以九龍江上游河水和廈門近岸海水為基底，利用HLB固相萃取柱建立了步驟簡單、富集凈化效果好的獸藥多殘留預(yù)處理方法。實驗考察了3

4、種不同固相萃取填料對水樣中多種類獸藥的富集能力，最終選擇了HLB(500mg/6mL)固相萃取柱并優(yōu)化了洗脫溶劑及其體積、淋洗溶劑及其體積、過柱速度、水樣pH、鹽度、Na2EDTA添加和過柱體積。在最優(yōu)條件下，進(jìn)行基底效應(yīng)和方法加標(biāo)回收率的驗證。采用基底匹配工作曲線對加標(biāo)20ng/L和100ng/L混標(biāo)的水樣進(jìn)行回收率的校正，克服基底效應(yīng)產(chǎn)生的影響。方法除了對5種雌激素類、螺旋霉素和尼卡巴嗪回收率較差外，其余14類72種獸藥的回收率均符

5、合要求。其中，河水在兩個加標(biāo)濃度下的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RelativeStandardDeviation，RSD，n=4）分別為40.8％～128.4％和0.2％～14.0％;海水在兩個加標(biāo)濃度下的回收率和RSD（n=4）分別為42.2％～117.3％和0.1％～14.6％;方法檢測限(MethodDetectionLimits，MDLs)在0.1～5.0ng/L，滿足表層水中痕量獸藥的檢測需求。應(yīng)用該方法分別于2011年5月（豐水

6、期）和2011年10月（枯水期）對九龍江上游北溪、西溪表層水，2011年4月（豐水期）和2011年8月（枯水期）對九龍江河口及廈門近岸海域中的表層水中79種獸藥殘留進(jìn)行監(jiān)測。結(jié)果顯示，河水和海水中檢出15種磺胺、4種喹諾酮、2種四環(huán)素、結(jié)晶紫、2種大環(huán)內(nèi)酯和氟甲砜霉素，檢出濃度在0.1～388.3ng/L，具有較顯著的分布特征。
　　 (3)沉積物中獸藥多殘留分析方法及其應(yīng)用
　　 以河口沉積物為基底，利用HLB固相萃取

7、柱建立了步驟簡單、凈化效果好的獸藥多殘留預(yù)處理方法。實驗選擇HLB(500mg/6mL)固相萃取柱并優(yōu)化了萃取溶劑、淋洗溶劑及其體積、過柱體積、Na2EDTA添加和銅粉添加量等。在最優(yōu)條件下，進(jìn)行基底效應(yīng)和方法加標(biāo)回收率的驗證。采用基底匹配工作曲線對加標(biāo)4μg/kg和20μg/kg混標(biāo)的沉積物進(jìn)行回收率的校正，克服基底效應(yīng)產(chǎn)生的影響。海洋沉積物中除了3種β-受體激動劑、4種β-內(nèi)酰胺、己烯雌酚和喹乙醇的回收率較差外，其余70種目標(biāo)獸藥在

8、兩個加標(biāo)濃度下的回收率和RSD(n=4)分別為40.4％～127.9％和0.4％～17.9％;MDLs在0.02～1.0μg/kg。池塘沉積物中除7種喹諾酮類、2種β-受體激動劑、3種大環(huán)內(nèi)酯類、頭孢噻呋、3種雌激素、喹乙醇和尼卡巴嗪的回收率較差外，其余61種目標(biāo)獸藥在兩個加標(biāo)濃度下的回收率和RSD（n=4）分別為40.1％～131.6％和0.6％～12.0％;MDLs在0.02～1.0μg/kg。方法滿足于沉積物中獸藥多殘留檢測。于2

9、011年12月對九龍江河口沉積物、2011年6月和11月對漳州養(yǎng)殖蝦塘沉積物進(jìn)行多種類獸藥監(jiān)測。結(jié)果顯示，沉積物中檢出6種磺胺、3種喹諾酮、林可霉素、4種四環(huán)素和3種工業(yè)染料，檢出濃度在0.1～85.6μg/kg，未見顯著的分布特征。
　　 (4)水產(chǎn)品中獸藥多殘留分析方法及其應(yīng)用
　　 以魚、蝦、貝等水產(chǎn)品為基底，比較HLB富集凈化和酸化乙腈提取、乙腈飽和正己烷除脂兩種萃取/凈化方式，最終選擇后者并優(yōu)化萃取溶劑、淋洗溶

10、劑、上樣體積和Na2EDTA添加等。在最佳實驗條件下，進(jìn)行基底效應(yīng)和方法加標(biāo)回收率的驗證。采用基底匹配工作曲線對加標(biāo)4μg/kg和20μg/kg混標(biāo)的水產(chǎn)品進(jìn)行回收率的校正，克服基底效應(yīng)產(chǎn)生的影響。本方法除了低濃度加標(biāo)濃度下少數(shù)目標(biāo)獸藥及魚肉樣品中的喹乙醇的回收率較低外，其余目標(biāo)獸藥在兩個加標(biāo)濃度水平下的回收率均較好;魚、蝦、貝肉的加標(biāo)回收率和RSD(n=4)分別為40.8％～125.6％和0.1％～16.0％（魚）、42.9％～131

11、.9％和0.1％～14.0％（蝦）、及43.5％～136.4％和0.3％～15.8％（貝）;大部分獸藥的MDLs在0.1～0.5μg/kg，滿足水產(chǎn)品中獸藥殘留的檢測需求。于2011年3月～2012年4月對廈門市場常見水產(chǎn)品（魚、蝦、貝及其干制品）中獸藥多殘留進(jìn)行調(diào)查。結(jié)果僅在養(yǎng)殖蝦中檢出4種喹諾酮、結(jié)晶紫和氟甲砜霉素，檢出濃度在0.2×10-1～2.6μg/kg，低于國內(nèi)外相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的最大殘留限量(MaximumResidueLimit