實(shí)時(shí)熒光PCR方法對(duì)食品真?zhèn)伪鎰e的研究.pdf

1、近年來(lái),隨著人們生活水平的不斷提高,對(duì)食品安全問(wèn)題提出了越來(lái)越高的要求,食品摻假問(wèn)題越來(lái)越受到人們的高度重視。我國(guó)多部法律禁止產(chǎn)品的造假摻假行為和正確標(biāo)識(shí)食品標(biāo)簽。食品生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)中摻假使假等不法行為,不僅直接損害消費(fèi)者的經(jīng)濟(jì)利益,而且極有可能因?yàn)槟承┻^(guò)敏原或有害成分的引入危害人民身體健康,同時(shí)也破壞我國(guó)市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)秩序。因此加強(qiáng)打假的力度刻不容緩,這就需要不斷提高食品檢測(cè)鑒別技術(shù),來(lái)鑒別摻雜造假的食品。實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)以其特異性、靈敏性、

2、簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于食品鑒偽檢測(cè)。本研究建立了食品中的香蕉、木瓜、水牛、黃牛、鱈形目、鱈科魚(yú)的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法。結(jié)果表明,該方法對(duì)被檢測(cè)物種具有良好的特異性,并對(duì)該方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。主要結(jié)果如下:
　　1、運(yùn)用建立的實(shí)時(shí)熒光PCR方法對(duì)5種香蕉及55種常見(jiàn)的非香蕉動(dòng)植物樣品進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示,該組引物探針對(duì)香蕉有很強(qiáng)的特異性,除香蕉外,其余55種對(duì)照樣品均未檢測(cè)到熒光信號(hào);該檢測(cè)方法對(duì)食品中香蕉成分的檢測(cè)靈敏度為0.00

3、01ng/μL香蕉 DNA和0.001％(W/W)香蕉粉。
　　2、采用實(shí)時(shí)熒光PCR方法,對(duì)木瓜成分特異性、靈敏度進(jìn)行檢測(cè)并進(jìn)行實(shí)際應(yīng)用的研究。實(shí)驗(yàn)表明探針和引物對(duì)木瓜有很強(qiáng)的特異性,通過(guò)對(duì)市售樣品的檢測(cè),檢測(cè)方法能夠用于食品中木瓜成分的鑒別。
　　3、運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光PCR方法對(duì)5種水牛樣品和47種常見(jiàn)的非水牛動(dòng)植物樣品進(jìn)行檢測(cè),5種水牛樣品均產(chǎn)生熒光信號(hào),其余非水牛樣品均不產(chǎn)生熒光信號(hào),表明該檢測(cè)方法具有特異性。本檢測(cè)方法

4、的重量檢測(cè)靈敏度為0.01%水牛奶(W/W), DNA濃度檢測(cè)靈敏度為0.001 ng/μL水牛DNA。運(yùn)用該方法對(duì)市售的水牛奶制品進(jìn)行實(shí)際樣品檢測(cè),均能很好的檢出水牛成分。
　　4、運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光PCR方法對(duì)4種黃牛樣品和46種常見(jiàn)的非黃牛動(dòng)植物樣品進(jìn)行檢測(cè),4種黃牛均產(chǎn)生熒光信號(hào),其余非黃牛樣品均不產(chǎn)生熒光信號(hào),表明該檢測(cè)方法具有特異性。本檢測(cè)方法的重量檢測(cè)靈敏度為0.0001%黃牛粉(W/W),DNA濃度檢測(cè)靈敏度為0.001

5、 ng/μL黃牛DNA。對(duì)市售的17種水牛奶制品進(jìn)行實(shí)際樣品檢測(cè),均檢出摻假黃牛成分。
　　5、對(duì)12種鱈魚(yú)樣品和71種非鱈魚(yú)動(dòng)植物樣品進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè),結(jié)果顯示,只有12種鱈魚(yú)樣品產(chǎn)生熒光信號(hào),其他非鱈魚(yú)樣品均不產(chǎn)生熒光信號(hào),實(shí)驗(yàn)表明本檢測(cè)方法具有特異性。本檢測(cè)方法的檢測(cè)限為0.01 ng/μL鱈魚(yú) DNA和0.01%鱈魚(yú)肉粉。對(duì)市售的鱈魚(yú)樣品進(jìn)行實(shí)際樣品檢測(cè),均能很好檢出鱈魚(yú)成分。
　　6、對(duì)7種鱈科魚(yú)樣品和54種