實時熒光PCR方法對食品真?zhèn)伪鎰e的研究.pdf

1、近年來,隨著人們生活水平的不斷提高,對食品安全問題提出了越來越高的要求,食品摻假問題越來越受到人們的高度重視。我國多部法律禁止產品的造假摻假行為和正確標識食品標簽。食品生產、經(jīng)營中摻假使假等不法行為,不僅直接損害消費者的經(jīng)濟利益,而且極有可能因為某些過敏原或有害成分的引入危害人民身體健康,同時也破壞我國市場經(jīng)濟秩序。因此加強打假的力度刻不容緩,這就需要不斷提高食品檢測鑒別技術,來鑒別摻雜造假的食品。實時熒光PCR技術以其特異性、靈敏性、

2、簡便、快速的優(yōu)點,廣泛應用于食品鑒偽檢測。本研究建立了食品中的香蕉、木瓜、水牛、黃牛、鱈形目、鱈科魚的實時熒光PCR檢測方法。結果表明,該方法對被檢測物種具有良好的特異性,并對該方法進行評價。主要結果如下:
　　1、運用建立的實時熒光PCR方法對5種香蕉及55種常見的非香蕉動植物樣品進行檢測。結果顯示,該組引物探針對香蕉有很強的特異性,除香蕉外,其余55種對照樣品均未檢測到熒光信號;該檢測方法對食品中香蕉成分的檢測靈敏度為0.00

3、01ng/μL香蕉 DNA和0.001％(W/W)香蕉粉。
　　2、采用實時熒光PCR方法,對木瓜成分特異性、靈敏度進行檢測并進行實際應用的研究。實驗表明探針和引物對木瓜有很強的特異性,通過對市售樣品的檢測,檢測方法能夠用于食品中木瓜成分的鑒別。
　　3、運用實時熒光PCR方法對5種水牛樣品和47種常見的非水牛動植物樣品進行檢測,5種水牛樣品均產生熒光信號,其余非水牛樣品均不產生熒光信號,表明該檢測方法具有特異性。本檢測方法

4、的重量檢測靈敏度為0.01%水牛奶(W/W), DNA濃度檢測靈敏度為0.001 ng/μL水牛DNA。運用該方法對市售的水牛奶制品進行實際樣品檢測,均能很好的檢出水牛成分。
　　4、運用實時熒光PCR方法對4種黃牛樣品和46種常見的非黃牛動植物樣品進行檢測,4種黃牛均產生熒光信號,其余非黃牛樣品均不產生熒光信號,表明該檢測方法具有特異性。本檢測方法的重量檢測靈敏度為0.0001%黃牛粉(W/W),DNA濃度檢測靈敏度為0.001

5、 ng/μL黃牛DNA。對市售的17種水牛奶制品進行實際樣品檢測,均檢出摻假黃牛成分。
　　5、對12種鱈魚樣品和71種非鱈魚動植物樣品進行實時熒光PCR檢測,結果顯示,只有12種鱈魚樣品產生熒光信號,其他非鱈魚樣品均不產生熒光信號,實驗表明本檢測方法具有特異性。本檢測方法的檢測限為0.01 ng/μL鱈魚 DNA和0.01%鱈魚肉粉。對市售的鱈魚樣品進行實際樣品檢測,均能很好檢出鱈魚成分。
　　6、對7種鱈科魚樣品和54種