蘋果中抗氧化黃酮結構和功能研究.pdf

1、本文對蘋果中的黃酮進行提取工藝、分離純化工藝、黃酮結構及抗油脂氧化方面的研究，與傳統(tǒng)的油脂抗氧化劑 BHT及黃酮代表物質蘆丁抗油脂氧化能力做比較，為找到新型抗油脂氧化劑及提高蘋果附加價值提供理論基礎。
　　蘋果果實中富含多酚類物質，在細胞遭到破壞后，多酚氧化酶會迅速破壞蘋果中具有生理功能的黃酮類物質，因此在原料預處理中，采用100℃短時加熱法破壞多酚氧化酶以保護黃酮類物質。對原料進行預處理后，運用單因素試驗與正交試驗確定有機溶劑熱

2、浸法提取黃酮類化合物的工藝，提取溫度為70℃，提取時間為1h，乙醇濃度為75％，料液比為1:10，每份樣品處理兩次，收集提取液，對提取液進行蒸發(fā)濃縮醇沉處理，得黃酮浸膏。
　　利用靜態(tài)吸附與解析法，通過朗格繆爾方程對大孔樹脂進行篩選，最終選用大孔吸附樹脂 AB-8進行蘋果黃酮的分離純化。進行單因素實驗及二次通用旋轉組合設計與優(yōu)化大孔樹脂 AB-8分離純化蘋果黃酮工藝：每次上樣量為250mL上樣液中黃酮含量200.00mg，洗脫劑乙

3、醇濃度選擇80%，上樣液流速1.5mL/min，洗脫液流速為1.8mL/min，上樣液濃度為0.82mg/mL，樹脂每使用2個周期做一次再生，黃酮得率平均為84.03%，收集流出液，濃縮干燥，得粗制黃酮，測其純度由31.87%提升至93.29%，純度測定采用鋁鹽絡合顯色法，在后續(xù)研究中發(fā)現(xiàn)有其他雜質干擾其純度測定。
　　粗制黃酮為混合化合物，利用葡聚糖凝膠柱Sephadex LH-20進行進一步單體分離，分離純化工藝為將1mL粗制

4、黃酮溶液加入凝膠柱，以0.8mL/min的流速進行梯度洗脫，洗脫劑為甲醇溶液，在完成梯度洗脫后用純甲醇進行洗脫至HPLC檢測為直線時停止。結合HPLC對洗脫液的檢測，可以成功得到一個黃酮單體，采用高效液相色譜法檢測黃酮單體的純度為83.579%。
　　得到蘋果黃酮單體后，進行結構與抗油脂氧化功能研究。黃酮類化合物含有特殊的功能基團，可與氧化或者還原能力不同的化合物發(fā)生反應，引起顏色變化。根據(jù)顏色變化可推測黃酮單體為黃酮醇類化合物。

5、利用黃酮的特征紫外光譜，加入位移劑觀察紫外光譜的位移變化，推測黃酮取代基的情況，確定在黃酮母核的3位置上有羥基取代，圍繞4′和7位置有鄰二酚羥基。
　　采用烘箱法檢測蘋果黃酮單體化合物、蘆丁、BHT的抗油脂氧化能力，抗氧化效果 BHT>蘋果黃酮單體化合物>蘆丁。從結構上分析蘋果黃酮單體僅就 A環(huán)的抗氧化能力高于蘆?。煌瑫rC環(huán)蘆丁的3-OH被蕓香糖取代，蘋果黃酮單體擁有3-OH，可聯(lián)合4位羧基與金屬離子形成穩(wěn)定的螯合物，延長油脂自動