10升牛初乳中IGF-I的生產及在大鼠腸粘膜損傷修復中的作用.pdf

1、牛初乳是指母牛產后2d~3d內所分泌的乳汁。初乳中不僅含有豐富的營養(yǎng)物質，而且還含有大量的生物活性物質。研究表明，IGF-I在牛初乳中大量存在，是牛初乳中最重要的促生長因子。
　　本研究以牛初乳為原料制備 IGF-I，研究了離心脫脂、凝乳酶凝乳、酸醇去結合蛋白、超濾除雜蛋白的工藝條件，確定的最適條件為：在36℃，4000 r/min的條件下離心15 min制備脫脂乳；脫脂乳溫度36℃，pH6.5，木瓜凝乳酶∶料液（V∶V）為1∶5

2、0，凝乳時間40 min；制備的乳清在4℃下與酸醇溶液以體積比1∶4混合均勻，靜置30 min后離心去除IGF-Ⅰ結合蛋白。然后經60 KD~80 KD中空纖維膜超濾去除大分子雜蛋白，再采用10 KD~20 KD去除小分子雜蛋白，確定的超濾工藝條件為料液溫度36℃，pH5.5，操作壓力0.06MP；最后采用6KD中空纖維膜超濾去除乳糖等小分子物質，確定的最適條件為料液溫度36℃，pH8.0，操作壓力0.06MP。按照已經建立的技術路線進

3、行大規(guī)模的IGF-I的制備，10升初乳經過上述工藝處理后共獲得粉狀產品63.02g，IGF-I相對含量為2106.3 ng/mg，IGF-I的回收率為48.79％。采用氫氧化鈉作為化學清洗劑，探索了清洗劑溫度、流量、時間等因素對膜清洗效果的影響，確定了氫氧化鈉的最佳清洗條件參數(shù)為：溫度35℃，流量為40L/h，時間為25min。建立了炎癥性腸炎（IBD）大鼠模型，以外源IGF-I干預IBD大鼠，通過對結腸組織中髓過氧化物酶和超氧化物歧化