酯酶提取及應(yīng)用于毒死蜱殘留量檢測的研究.pdf

1、近年來農(nóng)藥廣泛應(yīng)用于防治農(nóng)業(yè)和家庭的病蟲害,雖然使農(nóng)作物的產(chǎn)量大大提高,在一定程度上保障了人類的安全,但是由于農(nóng)藥,特別是有機(jī)磷農(nóng)藥的濫用,造成了嚴(yán)重的環(huán)境污染,破壞了生態(tài)的平衡。因此,如何快速有效地檢測有機(jī)磷農(nóng)藥具有非常重要的意義。傳統(tǒng)的檢測有機(jī)磷農(nóng)藥的常用方法多為集高靈敏度和專一性為一體的檢測方法如色譜法、質(zhì)譜法和波譜法等。它們通常耗時長、成本高、難以滿足現(xiàn)場快速檢測的需要。相對而言,酶法檢測則為檢測有機(jī)磷農(nóng)藥提供了一條快速、便捷的

2、途徑。本文首先從農(nóng)藥、酯酶和生物傳感器三個方面分別綜述了各自的研究進(jìn)展,進(jìn)一步證明了三者的有機(jī)結(jié)合帶來了分析檢測的重大變革,使方便、快捷、選擇性好、靈敏度高、成本相對低的檢測農(nóng)藥的方法能夠更加地普及,更加適應(yīng)現(xiàn)場快速分析檢測的需求。酶法檢測有機(jī)磷農(nóng)藥可分為兩類,一類為水解型,另一類為抑制型。本文主要針對酶活性抑制機(jī)理,對屬于酯酶B的植物酯酶和豬肝酯酶檢測有機(jī)磷農(nóng)藥展開了一些初步的研究。還選擇了一種目前在國內(nèi)廣泛使用的中等毒性殺蟲劑--毒

3、死蜱作為檢測對象。將植物酯酶、豬肝酯酶水解乙酰-2,6-二氯酚靛酚產(chǎn)生的吸光值的變化這一特性應(yīng)用于毒死蜱的檢測。對于植物酯酶通過正交實(shí)驗(yàn)很好地確定了它的最優(yōu)反應(yīng)條件,有效地降低了其最低檢測限度。對獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行一定的數(shù)據(jù)擬合處理獲得了毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)曲線,為毒死蜱的半定量檢測提供了一種有效的方法。應(yīng)用此方法可半定量檢測出在0.05mg/L-0.09mg/L濃度范圍內(nèi)的毒死蜱。將植物酯酶通過羧甲基纖維素離子交換層析柱進(jìn)行初步純化,將獲得的酶用于