嗜酸乳桿菌細菌素Lactobacillin XH1分離純化及特性研究.pdf

1、乳酸菌（Lactic acid bacteria）LAB細菌素（Bacteriocins）是乳酸菌在代謝過程中通過核糖體合成機制產生的一類具有抑菌活性的多肽、蛋白質或蛋白質復合物?？梢砸种破渌锾m氏陽性菌，如乳球菌、葡萄桿菌、李斯特菌等，對大多數(shù)的革蘭氏陰性菌、真菌等沒有抑制作用。目前能夠產細菌素的乳酸菌包括乳球菌、鏈球菌、乳酸桿菌、明串珠菌、片球菌和腸球菌屬，這些益生菌不僅可以改善腸道生態(tài)，而且是一類具有潛在開發(fā)能力的天然食品防腐劑和

2、飼料添加劑，乳酸菌細菌素已成為天然防腐劑研究與開發(fā)應用的熱點。
　　本研究旨在從實驗室保藏的一株嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)La-XH1分離純化細菌素，進而對其理化特性、抑菌機理進行分析研究。
　　1.采用平板挖井擴散法，在排除了有機酸、過氧化氫等影響的前提下，從抑菌活性、熱穩(wěn)定性、最適pH值及蛋白酶的敏感性等方面探討嗜酸乳桿菌所產細菌素Lactobacillin XH1的生物特性。結果表

3、明，Lactobacillin XH1對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、炭疽桿菌都有較強的抑制作用，是一種廣譜性抑菌物質；在pH1.0～5.0具有活性，在121℃處理20min其活性基本不變，具有一定熱穩(wěn)定性；對胰蛋白酶、胃蛋白酶及木瓜蛋白酶有敏感性，而對蛋白酶K及中性蛋白酶敏感性差。
　　2.試驗采取氯仿萃取和硫酸銨梯度沉淀（由飽和度60％升至80％，收集沉淀，水溶濃縮）兩種方法對嗜酸乳桿菌細菌素Lactobacillin XH1粗提

4、，得到的粗提液抑菌效果明顯，濃縮后的粗提液經(jīng)cellufine A-500填料柱在核酸蛋白純化系統(tǒng)上進行離子交換純化，收集具有抑菌活性的組分，濃縮測定出細菌素抑菌效價和比活力均顯著增強， Tricine-SDS-PAGE電泳測得Lactobacillin XH1分子量在14.4～20.1 kDa范圍內。
　　3.以大腸桿菌為指示菌，對嗜酸乳桿菌細菌素Lactobacillin XH1的抑菌機理進行了探討。結果表明，嗜酸乳桿菌細菌素