木聚糖酶的定向合成及其應用.pdf

1、論文集中探討了三個主題:里氏木霉用于木聚糖酶的生物合成和純化;木聚糖抽提物選擇性生物降解和未水解木聚糖的再利用;木聚糖酶對吳江紙漿的助漂作用.主要結果如下:1里氏木霉菌絲細胞干重與時間的關系.在兩小時和五小時之間分為三個階段,緩慢增加,快速增多,平緩.絲狀真菌分泌木聚糖降解酶到培養(yǎng)基中,尤其是胞外酶,而且真菌培養(yǎng)基提取木聚糖酶的水平比酵母或細菌都高.2誘導底物的影響.選擇合適的底物對木聚糖酶合成很重要底物不僅用做碳源和能源,而且為微生物

2、提供了必要的誘導化合物,有延長的生長時間能導致發(fā)酵過程增加量的生產.直接從木聚糖和純化的木聚糖中獲得的低分子量化合物誘導木聚糖酶的生產,是好的底物,經常用于小規(guī)模的試驗.這些相當純提取過的底物中接人菌絲體不僅逐漸產出越來越多的木聚糖酶,而且常相伴誘導形成少量的纖維素酶活性.當以木聚糖混合吳江麥草漿產酶,較高溫度時纖維素酶活顯著增加而木聚糖酶活形成減少.木聚糖混和黃豆粉或粗纖維做碳源可以誘導聚糖酶的生物合成.與13g/l木聚糖產酶相比,木

3、聚糖10g/l混和5g/l黃豆粉或5g/l粗纖維做碳源,胞外蛋白質濃度分別為0.368mg/ml和0.412mg/ml,低于替換成酶解渣做碳源同樣混和,酶解渣是玉米芯木聚糖的酶解固體殘留物,分析知道包含很多低分子量組分,纖維素酶活分別為0.167IU/ml和0.159IU/ml,也低于替換成酶解渣混合,濾紙酶活分別為0.81FPIU/g和0.85FPIU/g高于替換成酶解渣混合.混合粗纖維效果好于黃豆粉.大規(guī)模生產過程,由于底物成本在酶

4、生產的經濟中起到關鍵性作用,在幾個不同的試驗中制備不同的寡纖維素底物和測定純底物,如木聚糖或纖維素.如表中所示,碳源濃度可升至13g/l,對菌絲體底物濃度的增加是有益的,從酶解渣7g/l到10g/l濃度導致木聚糖酶比活力108.75IU/mg蛋白質,幾乎兩倍的增加量,從酶解渣10g/l到13g/l濃度對木聚糖酶形成有不利的結果.相比較,10g/l最優(yōu),木聚糖酶活58.3IU/ml,木聚糖酶比活力158IU/mg蛋白質.木聚糖酶能用做更確

5、切的水解目的,如從木聚糖抽提液中酶解的木低聚糖,這樣產生的木低聚糖(主要是木二糖和木三糖)帶有某種優(yōu)良用途可用做食品添加劑或替代的甜味劑.10g/l酶解渣時低聚木糖/總糖最大達47.8％.而酶解渣濃度13g/l時,低聚糖得率升至98％.因為過剩底物帶來酶和低分子碎片的協(xié)同作用.3木聚糖酶粗酶液的穩(wěn)定pH值和溫度是5.0和27℃.從菌絲體培養(yǎng)液中產出木聚糖酶,經熱處理(PartA),超濾(PartB),加硫酸胺(PartC)純化.木聚糖酶

6、水解合理的底物濃度是40g/l,木聚糖酶活是8.84IU/ml*g底物,12小時.4 Part C展示具有水解CMC交叉活性和β-木糖苷酶活性,但不能將木二糖水解成木糖,粗酶液玉米芯木聚糖得率定為100％,沉淀處理酶得率是49.1％.Part B和part C木糖含量減少至1.83％,1.33％,木低聚糖/木糖得率8.36％,9.74％5木聚糖酶對吳江麥草漿的助漂作用.木聚糖酶對吳江麥草漿助漂作用.純化減少了β-木糖苷酶,木糖量減少,內