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1、經(jīng)過(guò)以往幾年的工作積累,我實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)篩選、誘變,已經(jīng)得到了幾株酶活較高的產(chǎn)木聚糖酶的黑曲霉菌株,有149,J506及A25等,酶活可達(dá)544IU/m1。將實(shí)驗(yàn)室保藏的各產(chǎn)木聚糖酶的黑曲霉菌株進(jìn)行進(jìn)一步的篩選,并對(duì)其進(jìn)行單菌分離,得到一株產(chǎn)酶活力最高的菌株A.niger25(9)號(hào)菌,搖瓶中發(fā)酵酶活達(dá)到589IU/ml,將其確定為中試用菌株,進(jìn)行5噸罐發(fā)酵實(shí)驗(yàn)。發(fā)酵在88小時(shí)選擇放罐,發(fā)酵液酶活達(dá)到800IU/m1以上。 又對(duì)產(chǎn)酶
2、培養(yǎng)基進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)將原有培養(yǎng)基配方中的0.6%CaCO3除去便可使培養(yǎng)基初始pH值控制在6.2左右,而不是原來(lái)的7.89,以免去用鹽酸調(diào)整pH值的步驟,并且最終的發(fā)酵酶活還略有提高,達(dá)到了理想的調(diào)整結(jié)果。 在20噸發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)1噸種子罐接種即可滿(mǎn)足發(fā)酵需求,且最終放罐時(shí)木聚糖酶酶活達(dá)到900IU/m1以上,發(fā)酵周期在80-88h之間。 根據(jù)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果和5噸罐實(shí)驗(yàn)結(jié)果,發(fā)現(xiàn)選用3%膨潤(rùn)土做為板框過(guò)濾時(shí)
3、的助濾劑效果最佳。 對(duì)20噸罐發(fā)酵液進(jìn)行超濾,發(fā)現(xiàn)20℃下的超濾對(duì)酶活的損失較小,對(duì)發(fā)酵液的收率達(dá)到 75.3%。 將濃縮酶液加入適量的不同的防腐劑:苯甲酸鈉0.2%、山梨酸鉀0.2%、苯甲酸鈉0.2%+山梨酸鉀0.1%、疊氮化鈉0.05%,然后以木聚糖酶活力2500IU/mL為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行成品酶的標(biāo)準(zhǔn)化處理。測(cè)得產(chǎn)品中還具有一定的β-葡聚糖酶和纖維素酶活性。將經(jīng)過(guò)防腐及標(biāo)準(zhǔn)化的成品酶每種處理放三個(gè)保存桶(25kg裝),于常
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