黑曲霉A-25產(chǎn)木聚糖酶的變溫發(fā)酵研究.pdf

1、木聚糖酶能降解木聚糖成木糖或木寡糖，在飼料、造紙、食品以及能源工業(yè)中有著廣泛的用途。木聚糖酶及木聚糖酶基因的研究是當(dāng)前酶學(xué)研究熱點(diǎn)之一，在木聚糖酶得研究中，酶活普遍低下是一直困擾人們的一個主要問題，酶活低就會造成在酶制劑的工業(yè)化生產(chǎn)中，加大成本量，阻礙其應(yīng)用。而木聚糖酶的生產(chǎn)主要依靠微生物的發(fā)酵，在微生物的發(fā)酵過程中，人們發(fā)現(xiàn)微生物的菌體生長溫度，往往與代謝產(chǎn)物的溫度不一致，人為的控制發(fā)酵操作溫度，進(jìn)行不同階段不同溫度發(fā)酵，有助于其代謝

2、產(chǎn)物的合成。 本文對黑曲霉A-25進(jìn)行了變溫發(fā)酵試驗(yàn)，并獲得了很好的結(jié)果，通過進(jìn)一步研究，探討了變溫發(fā)酵導(dǎo)致酶活提高的機(jī)理，主要研究內(nèi)容如下： 首先采用不同的培養(yǎng)溫度，對黑曲霉A-25分別進(jìn)行了生長培養(yǎng)，通過測其生物量，得知黑曲霉A-25的最佳生長溫度為33℃，而采用不同的發(fā)酵溫度對黑曲霉A-25進(jìn)行產(chǎn)木聚糖酶的實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其最佳的產(chǎn)酶溫度為29℃，接著對木聚糖酶的發(fā)酵過程進(jìn)行變溫操作，得出前48小時33℃以后降為29℃發(fā)

3、酵是最佳的變溫方案，最高酶活為721U/ml比29℃恒溫發(fā)酵提高了110個酶活單位，且縮短了發(fā)酵周期8個小時。 通過交溫和恒溫條件下菌絲體的產(chǎn)酶能力分析，酶譜檢測分析，相對定量分析，對變溫發(fā)酵酶活提高的機(jī)理進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，變溫發(fā)酵促進(jìn)酶活大幅度提高不僅是因?yàn)榫z體總量的增大，還由于單位菌絲體的產(chǎn)酶能力提高引起的，在分子水平上我們進(jìn)一步通過酶譜檢測發(fā)現(xiàn)變溫發(fā)酵有可能刺激了xynⅢ提前合成或提高了合成量，應(yīng)用實(shí)時定量RT-PC