利迪鏈霉菌對發(fā)酵接種密度響應(yīng)的蛋白質(zhì)組研究.pdf

1、為了更好地提高利迪鏈霉菌E9（StreptomyceslydicusE9）的抗菌活性及利迪鏈菌素的產(chǎn)量，研究利迪鏈霉菌在次級代謝過程中的生理特性。本文以S.lydicusE9為研究體系，通過考察菌體在不同接種密度（1％、10%、30%,v/v）的培養(yǎng)條件下，細(xì)胞生長、細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)組及代謝物組的差異，探索利迪鏈霉菌E9對不同接種密度的差異響應(yīng)，揭示利迪鏈霉菌E9在次級代謝過程中的生理差異，為促進(jìn)利迪鏈菌素的生產(chǎn)提供一定的實驗依據(jù)。主要研

2、究結(jié)果如下：
　　1）不同的接種密度（1%、10%、30%,v/v）顯著影響利迪鏈霉菌的生長，30%接種密度縮短鏈霉菌生長的延滯期和發(fā)酵周期、顯著提高單位發(fā)酵體積利迪鏈菌素的產(chǎn)量。
　　2）通過二維凝膠電泳分析發(fā)現(xiàn)，利迪鏈霉菌E9在不同接種密度發(fā)酵條件下蛋白質(zhì)表達(dá)水平顯著差異，共檢測到195種差異表達(dá)蛋白質(zhì)。通過MALDI-TOF-MS鑒定分析，發(fā)現(xiàn)這些差異表達(dá)蛋白質(zhì)參與了鏈霉菌的多個代謝過程，如β-葡萄糖苷酶和UTP-葡萄

3、糖-1-磷酸尿苷酰轉(zhuǎn)移酶參與了淀粉的代謝，在高接種密度條件下其蛋白質(zhì)水平顯著上升；參與碳代謝的PfkA2、PfkA3、Zwf2、SucD、GalE1、GatB、TktA1、ThcA等蛋白質(zhì)都在高接種密度中表達(dá)水平明顯上升；但是，與谷氨酸合成相關(guān)的酶（GlnA,GlnII,GltD）的表達(dá)水平隨著接種密度上升而下降；同時，還有一些差異表達(dá)蛋白質(zhì)參與了鏈霉菌的次級代謝及細(xì)胞內(nèi)的氧化還原調(diào)控。
　　3）利用GC-TOFMS考察不同接種密