鷹嘴豆異黃酮的提取純化工藝及其應(yīng)用研究.pdf

1、鷹嘴豆,學(xué)名Cicer arietinum L,一年生或越年生草本植物,耐干旱、耐貧瘠,是目前世界上栽培面積較廣的食用豆類作物之一,為世界第二大消費(fèi)豆類。自然界異黃酮的資源十分有限,鷹嘴豆中含有異黃酮,且是一種營養(yǎng)學(xué)上有意義的食物資源,發(fā)芽后的鷹嘴豆中異黃酮含量會達(dá)到0.33％。異黃酮是鷹嘴豆中重要的營養(yǎng)成分,也是鷹嘴豆中最引人注目的一種功能成分。它不但附加值高,且不影響其它功能物質(zhì)的提取,有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
　　本課題首先研究了

2、從鷹嘴豆中提取異黃酮的具體工藝?？疾炝藛蝹€因子如鷹嘴豆的發(fā)芽與否、提取溶劑、溶劑濃度、提取時(shí)間、提取溫度對提取效果的影響,通過正交實(shí)驗(yàn)得出最優(yōu)化的提取方案:取發(fā)芽鷹嘴豆粉,石油醚脫脂,以65%的乙醇為提取溶劑,在85℃下,提取2次(每次2小時(shí))。在此條件下,發(fā)芽鷹嘴豆中異黃酮的得率為0.3234%,沒發(fā)芽的鷹嘴豆中異黃酮得率為0.2795%。并用微波法輔助提取,發(fā)現(xiàn)對脫脂后的豆粉微波處理3分鐘,可大大減少溶劑用量并且提高了異黃酮的得率。

3、
　　隨后,本實(shí)驗(yàn)建立了一種安全、高效、低成本的精制鷹嘴豆異黃酮的方法。從上面獲得的異黃酮粗提液,用6種大孔吸附樹脂對異黃酮粗提液進(jìn)行精制,結(jié)果表明XAD-2樹脂的精制效果最好,并研究了XAD-2樹脂的吸附動力學(xué)及吸附熱力學(xué)。獲得了XAD-2樹脂在不同溫度下對鷹嘴豆異黃酮的吸附等溫線,以及它對鷹嘴豆異黃酮的動態(tài)吸附及洗脫特性。實(shí)驗(yàn)證明XAD-2樹脂適合用來精制鷹嘴豆異黃酮,最終產(chǎn)品收率和純度都較高,分別為67%和21.29%。

4、r>　　本實(shí)驗(yàn)研究了異黃酮的應(yīng)用性能。用烘箱法研究了鷹嘴豆異黃酮對油脂的抗氧化活性,用鷹嘴豆異黃酮樣品2mg(異黃酮含量21.29%)均勻分散于10g新煉豬油中,定時(shí)測量豬油的過氧化值POV,結(jié)果表明鷹嘴豆異黃酮可有效抑制油脂的氧化達(dá)4天。研究了鷹嘴豆異黃酮的總體還原性能,通過將Fe3+還原成Fe2+的顯色反應(yīng)并且和Vc作平行對比實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明鷹嘴豆異黃酮的總體還原性能和Vc相當(dāng)。用Fenton反應(yīng)研究了鷹嘴豆異黃酮樣品對·OH的清除作

5、用,并且用甘露醇、苯甲酸、Vc作平行對比實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明異黃酮樣品清除·OH能力僅次于苯甲酸,當(dāng)清除率達(dá)50%時(shí)所需異黃酮樣品濃度為108.7mg/L。采用抑菌圈法研究了鷹嘴豆異黃酮的抑菌性能,實(shí)驗(yàn)用瓊脂牛肉膏蛋白胨作細(xì)菌培養(yǎng)基,在無菌操作的實(shí)驗(yàn)過程中考察了鷹嘴豆異黃酮樣品對金黃色葡萄球菌的抑制作用,并且與1%青霉素進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)鷹嘴豆異黃酮具有明顯的抑菌性能。測試結(jié)果證實(shí)鷹嘴豆異黃酮在抗氧化和抗菌方面具有較好的生理活性。
　　最后,

6、本實(shí)驗(yàn)研究了環(huán)糊精對異黃酮的包合作用,分別用β-環(huán)糊精和羥丙基-β-環(huán)糊精對其進(jìn)行包合,并用薄層色譜、紅外光譜分析的方法對包合物進(jìn)行鑒定。采用正交設(shè)計(jì)試驗(yàn),以包合物得率和包合物中異黃酮百分含量為考察指標(biāo),分別以研磨法和飽和水溶液法制備包合物。得出以包合物得率為指標(biāo)的最佳工藝條件是:鷹嘴豆異黃酮與HP-β-CD的質(zhì)量比為6:1,研磨時(shí)間為40min,加水倍量數(shù)為4倍。以包合物中異黃酮百分含量為指標(biāo)的最佳工藝條件是鷹嘴豆異黃酮與HP-β-C